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怀西扬

新虫 (初入文坛)

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[求助] 荧光定量相对定量标准曲线的材料、公式

新手，打算做茶花某个基因的荧光定量，相对定量，现在要构建标准曲线。
1、做标准曲线的材料选择有要求吗？有的文献上采用某个时期的材料，然后稀释成几个梯度；有的文献上又是将各个时期的材料混合，再稀释。
2、标准曲线的公式是什么？我看见有的文献上写着
Y= -3.2013 X + 30.827
这里Y、X分别代表什么？-3.2013 和30.827又是怎样得到的？

谢谢！

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1楼 2012-07-24 11:04:05

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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
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怀西扬: 金币+1, ★有帮助 2012-07-24 14:09:02
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-24 14:21:16

标准曲线是自己做出来的数据。
看一下相对定量的原理，选定内参基因，调节内参基因和目的基因的扩增效率一致；
将目的基因倍比稀释，保证至少5个稀释点的数据能用；
将对应数据做成标准曲线（excel），会有对应的线性公式给出的

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偶时晴天偶时雨

2楼2012-07-24 13:07:16

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怀西扬

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by xiaoyanzi517 at 2012-07-24 13:07:16
标准曲线是自己做出来的数据。
看一下相对定量的原理，选定内参基因，调节内参基因和目的基因的扩增效率一致；
将目的基因倍比稀释，保证至少5个稀释点的数据能用；
将对应数据做成标准曲线（excel），会有对应的 ...

不是很明白。比如我取了第1天、第2天、第3天、第4天、第5天这5个时期的材料。那做标准曲线的话，是随便取某一天的村料，比如第2天的材料，拿来稀释成几个梯度吗？

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3楼2012-07-24 13:39:55

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