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nculst

银虫 (正式写手)

[求助] 求高手指点,荧光定量PCR相对定量法的结果 已有1人参与

本人提大鼠肝脏的RNA,用TaKaRa的试剂盒反转录的,SYBR试剂做的荧光定量PCR,内参用的是GAPDH,目的基因是Hepcidin。溶解曲线单峰,Ct值在15-35之间,但实验组跟我的对照组2-ΔΔCt结果高达7000倍,这种结果可以用吗?求高手指导……
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-03-30 16:51:30
以前实验室的人做过,也有相差上千倍的,结果老板让他做了time dependent
然后发现,处理后不同时间,mRNA相差随时间变化的,
然后得了一篇J. Bacterial
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-03-30 14:25:29
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nculst

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-03-30 14:25:29
以前实验室的人做过,也有相差上千倍的,结果老板让他做了time dependent
然后发现,处理后不同时间,mRNA相差随时间变化的,
然后得了一篇J. Bacterial

谢谢您的回答,我刚做这方面,以前也没有学过这方面的知识,您的意思是我做的结果可能跟我提取的RNA放置时间长短有关吗?
3楼2014-03-30 15:05:21
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

不是这个意思,而是你药物处理后,细胞体内的mRNA会随着时间的变化而变化
行至水穷处,坐看云起时
4楼2014-03-31 21:17:15
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