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怀西扬

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量 相对定量 标准曲线的材料、公式

新手,打算做茶花某个基因的荧光定量,相对定量,现在要构建标准曲线。
1、做标准曲线的材料选择有要求吗?有的文献上采用某个时期的材料,然后稀释成几个梯度;有的文献上又是将各个时期的材料混合,再稀释。
2、标准曲线的公式是什么?我看见有的文献上写着
    Y= -3.2013 X + 30.827
这里Y、X分别代表什么?-3.2013 和30.827又是怎样得到的?

谢谢!
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
怀西扬: 金币+1, 有帮助 2012-07-24 14:09:02
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-24 14:21:16
标准曲线是自己做出来的数据。
看一下相对定量的原理,选定内参基因,调节内参基因和目的基因的扩增效率一致;
将目的基因倍比稀释,保证至少5个稀释点的数据能用;
将对应数据做成标准曲线(excel),会有对应的线性公式给出的
偶时晴天偶时雨
2楼2012-07-24 13:07:16
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怀西扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoyanzi517 at 2012-07-24 13:07:16
标准曲线是自己做出来的数据。
看一下相对定量的原理,选定内参基因,调节内参基因和目的基因的扩增效率一致;
将目的基因倍比稀释,保证至少5个稀释点的数据能用;
将对应数据做成标准曲线(excel),会有对应的 ...

不是很明白。比如我取了第1天、第2天、第3天、第4天、第5天这5个时期的材料。那做标准曲线的话,是随便取某一天的村料,比如第2天的材料,拿来稀释成几个梯度吗?
3楼2012-07-24 13:39:55
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

那就看你的目的,再参考相关文献来选取是动态还是静态的了。
偶时晴天偶时雨
4楼2012-07-24 13:50:04
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