24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3147  |  回复: 17
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

昺昺

木虫 (小有名气)

[求助] 实时荧光定量的数据导出后怎么处理啊?

如题,我做的是比较CT,是新手,请多多指教,不甚感激!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

太阳出来,星星要走。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

见证2011

至尊木虫 (文坛精英)

莫名的忧伤

【答案】应助回帖

昺昺(金币+2): 谢谢 2011-12-08 19:41:30
1949stone(MolEPI+1): 要鼓励 2011-12-09 00:58:35
http://wenku.baidu.com/view/e109260302020740be1e9b2b.html  楼主可以下载相关文献,自己研究下!谢谢!希望对你有用!多多奖励关照新手!
幸福是奋斗出来的!
3楼2011-12-08 19:13:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

我做的一般是三个重复,重复性不太好,靶比较大,还请高手指点一二。
还有,判断一个基因的上调与否,使用什么样的标准?只要实验组的相对定量比对照组高就能说明是上调吗?还是说增加不超过一定范围就是没有变化?
太阳出来,星星要走。
2楼2011-12-08 18:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

请高手继续指教,谢谢
太阳出来,星星要走。
4楼2011-12-08 19:42:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 很热心 2011-12-09 00:58:56
昺昺(金币+5): 2011-12-09 08:56:49
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2852616
看看这个,肯定会有所帮助!
人的品德很重要!!!不能失去德行!!!
5楼2011-12-08 22:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰山来啦

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 很好 2011-12-09 00:59:18
昺昺(金币+2): 2011-12-09 09:00:57
判断基因是否上调肯定要跟Actin等类似的基因比较啊,要不你怎能保证原来cDNA浓度就一样啊,建议新手不要直接做定量,先从RT做起
6楼2011-12-08 23:27:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰山来啦 at 2011-12-08 23:27:36:
判断基因是否上调肯定要跟Actin等类似的基因比较啊,要不你怎能保证原来cDNA浓度就一样啊,建议新手不要直接做定量,先从RT做起

我是选用了一个管家基因作为内参,然后做相对定量,我的目的基因相对于参照组来说大约是1.5左右,该如何具体判断呢,还请继续指教
太阳出来,星星要走。
7楼2011-12-09 09:00:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰山来啦

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

昺昺(金币+3): 2011-12-09 20:57:37
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰山来啦 at 2011-12-08 23:27:36:
判断基因是否上调肯定要跟Actin等类似的基因比较啊,要不你怎能保证原来cDNA浓度就一样啊,建议新手不要直接做定量,先从RT做起

做半定量时,首先要把管家基因的扩增亮度调到大概一致(当然是肉眼观察啦)一般24-26个循环为宜,然后再在此条件下比较其它基因的表达,当然相对定量只能根据相同循环数下条带的量度来判断和比较基因的表达情况,实时定量(qRT)呢,就会告诉你一数值,可以根据相应公式计算相对管家基因的表达倍数,来比较基因被上调还是抑制
8楼2011-12-09 20:04:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

昺昺(金币+5): 2011-12-10 12:49:43
变化多大才算显著,这是统计学的问题了……P值大于多少多少是差异显著,大于多少多少是差异极显著……具体我也不懂,楼主可以看看教材吧。
9楼2011-12-10 02:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

昺昺(金币+5): 2011-12-10 12:51:23
昺昺(金币+20): 2011-12-25 10:46:17
引用回帖:
2楼: Originally posted by 昺昺 at 2011-12-08 18:51:45:
我做的一般是三个重复,重复性不太好,靶比较大,还请高手指点一二。
还有,判断一个基因的上调与否,使用什么样的标准?只要实验组的相对定量比对照组高就能说明是上调吗?还是说增加不超过一定范围就是没有变化?

一般一次实验里重复3管就可以了。要提高重复性:
1.操作手法,加样尽可能准;
2.尽量配成体系,比如说可以把除了模板、引物的成分配好,按照不同引物分装,然后加入引物,按照不同模板再分装,最后每管单独加入模板;
3.选用好的耗材,特别是管子,很多山寨货盖不紧,蒸发厉害;
4.如果仪器可以做,引入Rox,可以矫正液体量的差异;
5.不同的样品,尽量保证用量一致。从反转录开始,就用同样量的RNA。虽然actin可以矫正样品量差异,但是还是尽量从一开始就控制好。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2011-12-10 02:09:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 昺昺 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 081700,311,求调剂 +15 冬十三 2026-04-04 16/800 2026-04-06 14:17 by lqwchd
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +9 多多爱吃汉堡 2026-04-04 9/450 2026-04-06 14:14 by lqwchd
[考研] 081700化学工程与技术 一志愿中海洋 323 求调剂学校 +18 披星河 2026-04-03 18/900 2026-04-06 13:55 by BruceLiu320
[考研] 一志愿郑州大学材料与化工085600,求调剂 +26 吃的不少 2026-04-02 26/1300 2026-04-06 13:40 by BruceLiu320
[考研] 0703化学 +18 妮妮ninicgb 2026-04-04 19/950 2026-04-06 12:51 by zllcz
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +14 刺痛jk 2026-04-06 15/750 2026-04-06 11:57 by lijunpoly
[考研] 304求调剂 +3 luoye0105 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:16 by 土木硕士招生
[考研] 282求调剂 +7 aaa车辆 2026-04-02 11/550 2026-04-05 17:24 by yulian1987
[考研] +5 化工专硕323分 2026-04-04 5/250 2026-04-05 08:02 by 544594351
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 335求调剂 +7 沈清璃 2026-04-03 7/350 2026-04-03 18:55 by lijunpoly
[考研] 313求调剂 +3 ~微微凉~ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 273求调剂 +20 李芷新1 2026-03-31 20/1000 2026-04-03 09:58 by linyelide
[考研] 324求调剂 +5 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:16 by sanrepian
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 一志愿北京科技,085601总分305求调剂 +9 半生瓜! 2026-04-01 11/550 2026-04-02 08:28 by Wang200018
[考研] 085600,321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-31 13/650 2026-04-01 12:35 by chemdavid
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
信息提示
请填处理意见