24小时热门版块排行榜    

查看: 3413  |  回复: 17
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

昺昺

木虫 (小有名气)

[求助] 实时荧光定量的数据导出后怎么处理啊?

如题,我做的是比较CT,是新手,请多多指教,不甚感激!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

太阳出来,星星要走。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

见证2011

至尊木虫 (文坛精英)

莫名的忧伤

【答案】应助回帖

昺昺(金币+2): 谢谢 2011-12-08 19:41:30
1949stone(MolEPI+1): 要鼓励 2011-12-09 00:58:35
http://wenku.baidu.com/view/e109260302020740be1e9b2b.html  楼主可以下载相关文献,自己研究下!谢谢!希望对你有用!多多奖励关照新手!
幸福是奋斗出来的!
3楼2011-12-08 19:13:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

我做的一般是三个重复,重复性不太好,靶比较大,还请高手指点一二。
还有,判断一个基因的上调与否,使用什么样的标准?只要实验组的相对定量比对照组高就能说明是上调吗?还是说增加不超过一定范围就是没有变化?
太阳出来,星星要走。
2楼2011-12-08 18:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

请高手继续指教,谢谢
太阳出来,星星要走。
4楼2011-12-08 19:42:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 很热心 2011-12-09 00:58:56
昺昺(金币+5): 2011-12-09 08:56:49
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2852616
看看这个,肯定会有所帮助!
人的品德很重要!!!不能失去德行!!!
5楼2011-12-08 22:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰山来啦

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 很好 2011-12-09 00:59:18
昺昺(金币+2): 2011-12-09 09:00:57
判断基因是否上调肯定要跟Actin等类似的基因比较啊,要不你怎能保证原来cDNA浓度就一样啊,建议新手不要直接做定量,先从RT做起
6楼2011-12-08 23:27:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰山来啦 at 2011-12-08 23:27:36:
判断基因是否上调肯定要跟Actin等类似的基因比较啊,要不你怎能保证原来cDNA浓度就一样啊,建议新手不要直接做定量,先从RT做起

我是选用了一个管家基因作为内参,然后做相对定量,我的目的基因相对于参照组来说大约是1.5左右,该如何具体判断呢,还请继续指教
太阳出来,星星要走。
7楼2011-12-09 09:00:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰山来啦

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

昺昺(金币+3): 2011-12-09 20:57:37
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰山来啦 at 2011-12-08 23:27:36:
判断基因是否上调肯定要跟Actin等类似的基因比较啊,要不你怎能保证原来cDNA浓度就一样啊,建议新手不要直接做定量,先从RT做起

做半定量时,首先要把管家基因的扩增亮度调到大概一致(当然是肉眼观察啦)一般24-26个循环为宜,然后再在此条件下比较其它基因的表达,当然相对定量只能根据相同循环数下条带的量度来判断和比较基因的表达情况,实时定量(qRT)呢,就会告诉你一数值,可以根据相应公式计算相对管家基因的表达倍数,来比较基因被上调还是抑制
8楼2011-12-09 20:04:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

昺昺(金币+5): 2011-12-10 12:49:43
变化多大才算显著,这是统计学的问题了……P值大于多少多少是差异显著,大于多少多少是差异极显著……具体我也不懂,楼主可以看看教材吧。
9楼2011-12-10 02:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

昺昺(金币+5): 2011-12-10 12:51:23
昺昺(金币+20): 2011-12-25 10:46:17
引用回帖:
2楼: Originally posted by 昺昺 at 2011-12-08 18:51:45:
我做的一般是三个重复,重复性不太好,靶比较大,还请高手指点一二。
还有,判断一个基因的上调与否,使用什么样的标准?只要实验组的相对定量比对照组高就能说明是上调吗?还是说增加不超过一定范围就是没有变化?

一般一次实验里重复3管就可以了。要提高重复性:
1.操作手法,加样尽可能准;
2.尽量配成体系,比如说可以把除了模板、引物的成分配好,按照不同引物分装,然后加入引物,按照不同模板再分装,最后每管单独加入模板;
3.选用好的耗材,特别是管子,很多山寨货盖不紧,蒸发厉害;
4.如果仪器可以做,引入Rox,可以矫正液体量的差异;
5.不同的样品,尽量保证用量一致。从反转录开始,就用同样量的RNA。虽然actin可以矫正样品量差异,但是还是尽量从一开始就控制好。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2011-12-10 02:09:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 昺昺 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 10:39 by 3OOjAIS77qg2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:27 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见