| 查看: 3125 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
实时荧光定量 相对定量 标准曲线的问题
|
||
|
各位同仁： 我最近做相对定量，首先做标准曲线看内参和目的基因的扩增效率是否一致，在这个环节上一直无法突破。 问题是：我的cDNA以10倍梯度稀释了13个梯度，但是Ct值都很接近，都在19-21之间。我的体系是takela的，20ul mix10 上0.4 下0.4 模板1 水8.2 95° 30s 95°5s 60°30s 40个循环 用的是96孔板，先把mix和上下，水混匀分装后，再加模板。 mix用之前先颠倒混匀。 加样时避免气泡的产生。 我的cDNA是由天根的反转录试剂盒得来的，用5ug的总RNA反转录成50ul的体系。 请各位帮我分析一下原因吧！做了3周了，一直这样无进展，很苦闷！谢谢您的分享和帮助了~ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有206人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR ，条件优化
已经有13人回复
- 最近两次的荧光定量溶解曲线 有多个峰
已经有10人回复
- 荧光定量 相对定量 标准曲线的材料、公式
已经有3人回复
- 求解：实时荧光定量PCR奇峰
已经有18人回复
- 荧光定量sybrgreen染料荧光值大小的问题
已经有8人回复
- 求解：Taqman MGB实时荧光定量PCR空白对照组荧光信号很强怎么回事？
已经有10人回复
- 荧光定量PCR。。。求助求助
已经有17人回复
- 荧光PCR，想做标准曲线
已经有4人回复
- 荧光pcr标准曲线问题
已经有21人回复
- 荧光定量PCR标准曲线的建立
已经有3人回复
- 荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了
已经有17人回复
- 实时荧光定量的数据导出后怎么处理啊？
已经有17人回复
- 荧光定量曲线问题
已经有5人回复
- Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
已经有7人回复
- 相对定量PCR求助
已经有16人回复
- 标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线
已经有5人回复
- 荧光定量需要3个重复样本吗
已经有12人回复
- real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗？
已经有4人回复
- 【求助/交流】相对定量可以不做标准曲线吗
已经有4人回复
9楼2013-03-26 11:36:40
3楼2013-03-21 13:37:10
4楼2013-03-21 17:09:12
5楼2013-03-21 17:29:48
5
