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细菌荧光定量PCR的内参 已有4人参与
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各位大侠： 我想在在做细菌的荧光定量PCR，染料法，以前很多文章中都用16SrRNA做内参，可是我听一个同事说现在用16SrRNA做内参，国外的文章都不承认。可是要自己筛选内参真的不容易，因为这个细菌的基因组序列不知道，只能根据相近的菌的基因组设计引物，又要再保守区设计，又要特异扩增，真的不容易。我刚刚设计了几对都没成功！ 请问 1.用16SrRNA做内参，是不是真的国外的文章都不接受？ 2.大家做细菌的荧光定量PCR都用什么做内参？ 3.都自己筛选内参吗？ 万分感谢！ |
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cjl25413477
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- 专业: 植物病理学
2楼2014-10-13 15:42:47
3楼2014-10-13 16:08:35
4楼2014-10-14 09:13:53
5楼2014-10-15 11:14:05
【答案】应助回帖
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可以用细菌的持家基因作为内参吗？铜绿acsA-F ACCTGGTGTACGCCTCGCTGAC acsA-R GACATAGATGCCCTGCCCCTTGAT aroE-F TGGGGCTATGACTGGAAACC aroE-R TAACCCGGTTTTGTGATTCCTACA guaA-F CGGCCTCGACGTGTGGATGA guaA-R GAACGCCTGGCTGGTCTTGTGGTA mutL-F CCAGATCGCCGCCGGTGAGGTG mutL-R CAGGGTGCCATAGAGGAAGTC nuoD-F ACCGCCACCCGTACTG nuoD-R TCTCGCCCATCTTGACCA ppsA-F GGTCGCTCGGTCAAGGTAGTGG ppsA-R GGGTTCTCTTCTTCCGGCTCGTAG trpE-F GCGGCCCAGGGTCGTGAG trpE-R CCCGGCGCTTGTTGATGGTT |
6楼2015-04-23 21:45:44
7楼2017-06-02 12:48:56
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