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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量阴性对照也扩增出了曲线，是什么情况？
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wxl007777

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量阴性对照也扩增出了曲线，是什么情况？



如图，用水代替模板，竟然还是有扩增曲线，这是什么情况？
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1楼2013-05-16 22:55:29
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wxl007777: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2013-05-17 15:53:40
可能是模板污染到了对照, 也可能是引物二聚体.
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2楼2013-05-17 01:07:27
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检查一下你阴性对照的熔解曲线是否单峰，熔解温度是多少。
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3楼2013-05-17 08:39:46
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wxl007777

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-17 08:39:46
检查一下你阴性对照的熔解曲线是否单峰，熔解温度是多少。



溶解曲线很乱....
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4楼2013-05-17 10:57:25
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wxl007777

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-17 01:07:27
可能是模板污染到了对照, 也可能是引物二聚体.

溶解曲线的峰比较杂，所以感觉都不是....
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5楼2013-05-17 10:58:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wxl007777: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-05-17 15:53:20
引用回帖:
5楼: Originally posted by wxl007777 at 2013-05-17 10:58:24
溶解曲线的峰比较杂，所以感觉都不是.......

那些低于80°C的多半是引物二聚体。熔解温度高可能是模板污染问题。
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6楼2013-05-17 11:54:47
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