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zhiqiang5070木虫 (正式写手)
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胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
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我的cDNA胶回收后条带约1000kb强，之后连接到T载体上（将回收产物与pMD18-T载体16℃连接过夜，胶回收DNA4.5微，T载体 0.5微，SolutionI 5微升），之后转化到天根公司Ｅ.ｃｏｌｉ感受态细胞中，接菌，挑菌后摇菌。之后菌液ＰＣＲ（自己的引物和Ｍ１３引物分别跑了都差不多），可是电泳条带发生改变，出现了２０００多ｋｂ的条带。 各位学长学姐，请问这是怎么回事？好像出现了ｃＤＮＡ自己连接起来的现象。还有如何解决？本人小虫，没啥金币，还望见谅。  |
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 核酸生物学实验经验 | 【分子生物】EPI帖 |
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8楼2012-05-10 18:56:22
zhiqiang5070
木虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
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- 虫号: 743352
- 注册: 2009-04-08
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
上面写错了，我的cDNA为1kb多点，不是1000kb，后面2kb多点，嘿嘿。
2楼2011-06-10 14:52:13
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本帖内容被屏蔽 |
3楼2011-06-10 14:56:16
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
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4楼2011-06-10 15:07:59
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