版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3786)
>文献求助 (354)
>导师招生 (332)
>虫友互识 (329)
>休闲灌水 (100)
>论文投稿 (83)
>招聘信息布告栏 (82)
>硕博家园 (78)
>博后之家 (76)
>考博 (73)
>催化 (54)
>公派出国 (53)
>考研 (45)
>基金申请 (44)
>论文道贺祈福 (41)
>教师之家 (35)

本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhiqiang5070

木虫 (正式写手)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 2711.4
散金: 66
红花: 1
帖子: 459
在线: 117小时
虫号: 743352
注册: 2009-04-08
性别: GG
专业: 抗肿瘤药物药理

[求助] 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题

我的cDNA胶回收后条带约1000kb强，之后连接到T载体上（将回收产物与pMD18-T载体16℃连接过夜，胶回收DNA4.5微，T载体 0.5微，SolutionI 5微升），之后转化到天根公司Ｅ.ｃｏｌｉ感受态细胞中，接菌，挑菌后摇菌。之后菌液ＰＣＲ（自己的引物和Ｍ１３引物分别跑了都差不多），可是电泳条带发生改变，出现了２０００多ｋｂ的条带。
各位学长学姐，请问这是怎么回事？好像出现了ｃＤＮＡ自己连接起来的现象。还有如何解决？本人小虫，没啥金币，还望见谅。

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

关于PCR产物胶回收连T载的问题～已经有7人回复
菌液PCR出现问题了已经有23人回复
PCR后电泳问题已经有7人回复
PCR条带很淡不好胶回收怎么办已经有20人回复
用胶回收产物PCR的问题已经有9人回复
PCR产物及PCR胶回收产物的存放问题已经有8人回复
转化后细菌提质粒，PCR条带很诡异已经有14人回复
菌液PCR产物电泳图，怎么解释？已经有12人回复
转化后菌液PCR鉴定，没有目的条带已经有15人回复
菌液PCR出现杂带是什么原因？已经有17人回复
电泳条带很淡，能用于割胶回收吗已经有7人回复
菌液PCR没东西，但是提完质粒能跑出来条带，为什么啊？已经有16人回复
胶回收后再次pcr无目的条带，急，望神人指点。。。已经有16人回复
PCR产物的电泳条带出问题了！加了oading buffer和不加loading buffer的大小不一样！！已经有12人回复
连接与转化问题已经有5人回复
胶回收后电泳检测，条带向相反方向跑是怎么回事？已经有10人回复
PCR产物回收之后跑胶浓度过低已经有17人回复
PCR和回收条带的问题已经有5人回复
关于切胶回收后有质粒污染和拼接PCR涂抹装条带的问题，有点长，呵呵已经有13人回复
PCR产物电泳时，为什么有的条带不亮，有的特别亮呀？已经有4人回复
PCR后电泳条带异常已经有10人回复
【求助/交流】pcr条带问题已经有13人回复
【求助/交流】PCR电泳结果疑问已经有13人回复
【求助/交流】PCR产物电泳问题已经有8人回复
【求助/交流】有关菌液PCR的问题已经有14人回复

无善无恶心之体

1楼 2011-06-10 13:56:19

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)

MolEPI: 4
应助: 184 (高中生)
金币: 4273
散金: 271
红花: 14
帖子: 1308
在线: 986.6小时
虫号: 67494
注册: 2005-05-07
专业: 系统生物学

引用回帖:

2314060楼: Originally posted by dnaxxx at 2011-12-13 07:59:21:
2k多的带应该是T载体本身，你的菌液裂解物加多了

没有你的目的条带的话应该是没有连接上

同意.

为什么

8楼2012-05-10 18:56:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 zhiqiang5070 的主题更新