24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1028  |  回复: 6

jackiechan

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】转化子质粒为什么无法提取出来 已有4人参与

请问为什么我把一个基因用pet28a转入e.coli k-12,但在转化子中无法提取质粒呢?转化子能在卡那的lb培养基中生长,而未转化的e.coli k-12不能生长。谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-23 22:44
你这样说过于笼统,没法了解你的具体提取操作是怎么样的啊。肯定你提取过程中出现了问题。
2楼2010-04-23 21:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果你提别的菌的质粒没有问题的话;估计,提不出来很可能就不是阳性转化子
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-04-23 21:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)

"提不出来很可能就不是阳性转化子"
但转化子能在卡那的lb培养基中生长,而未转化的e.coli k-12不能生长啊
4楼2010-04-23 22:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

★ ★
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-26 17:09
楼主是用试剂盒提的还是纯手工提的?
提别的质粒有问题吗?感觉给的表述太少了
pET28a的拷贝量比起克隆质粒来说要低一点,浓度低一点是正常的,但是不至于没有。
手工提的话会不会乙醇沉淀的时候不够温柔或离心时间不足就把底部的沉淀同乙醇一起给抛弃了?
你平皿上的菌有请有经验的人看过吗?有时候kan平皿上会长一种白的的,但比E.coli紧实【完全没有透明度】,边缘也更光滑的杂菌。
终于熬成木虫了……
5楼2010-04-24 06:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)

用试剂盒提的,提bl21的质粒没有问题,菌落也不是很白啊
6楼2010-04-26 15:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)

先谢谢你们,我的菌落有透明度的,应该不是污染,而且菌落pcr做出来了,但非特异性条带很亮,不知如何改进
7楼2010-04-27 16:11:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jackiechan 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂生寻找导师 +3 顾瞻考研啊 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:18 by 啵啵啵0119
[考研] 0817化学工程与技术求调剂,一志愿中海洋319 +13 lv945 2026-04-04 13/650 2026-04-05 18:14 by 猪会飞
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 4/200 2026-04-05 11:48 by arrow8852
[考研] 081700,311,求调剂 +12 冬十三 2026-04-04 13/650 2026-04-05 08:43 by qlm5820
[考研] 285求调剂 +11 哦呦呼o 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:15 by 544594351
[考研] 考研调剂 +6 15615482637 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:43 by yu221
[考研] 材料科学与工程调剂 +19 深V宿舍吧 2026-03-30 20/1000 2026-04-04 22:13 by hemengdong
[考研] 341求调剂 +3 洛多罗 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:36 by 智能智慧
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +11 努力奋斗112 2026-04-04 11/550 2026-04-04 20:51 by 蓝云思雨
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +39 洛神哥哥 2026-03-31 41/2050 2026-04-03 21:51 by qlm5820
[考研] 070300一志愿211,312分求调剂院校 +16 小黄鸭宝 2026-03-30 16/800 2026-04-03 19:53 by lijunpoly
[考研] 310求调剂 +18 争取九点睡 2026-03-30 18/900 2026-04-03 18:35 by ls刘帅
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 11/550 2026-04-03 13:32 by akdhjs
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 314求调剂 +11 1xiaojun23 2026-03-31 12/600 2026-04-02 12:31 by 1xiaojun23
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 00:21 by 百秒光年
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-31 4/200 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
信息提示
请填处理意见