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jackiechan

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】转化子质粒为什么无法提取出来已有4人参与

请问为什么我把一个基因用pet28a转入e.coli k-12，但在转化子中无法提取质粒呢？转化子能在卡那的lb培养基中生长，而未转化的e.coli k-12不能生长。谢谢

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1楼 2010-04-23 21:20:22

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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

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★ ★
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-26 17:09

楼主是用试剂盒提的还是纯手工提的？
提别的质粒有问题吗？感觉给的表述太少了
pET28a的拷贝量比起克隆质粒来说要低一点，浓度低一点是正常的，但是不至于没有。
手工提的话会不会乙醇沉淀的时候不够温柔或离心时间不足就把底部的沉淀同乙醇一起给抛弃了？
你平皿上的菌有请有经验的人看过吗？有时候kan平皿上会长一种白的的，但比E.coli紧实【完全没有透明度】，边缘也更光滑的杂菌。

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终于熬成木虫了……

5楼2010-04-24 06:36:55