| 查看: 2689 | 回复: 10 | |||
ggyy0911铁虫 (正式写手)
|
[求助]
毕赤酵母菌落PCR筛选，这样到底是转化进去没？ 已有3人参与
|
||
|
我做的GS115，用Takara的Direct PCR裂解液裂解菌落，然后做菌落PCR，一端通用引物，一端特异性引物P不出来条带。 然后我用两端特异性引物P，结果有的菌就P出目的条带了。 最诡异的是我同时选了一个样做两端通用引物，P出了两条带，一条3K左右，一条淡淡的500bp，GS115本身有个条带就在3Kb附近，空载载体能P出500bp的条带，这样的话这个样就是空载咯？可是特异性引物P的时候，这个样是有目的条带的。 在我看来，用两端通用引物；一端通用一端特异；两端都特异；三种方法只要P出目的条带，结果不都是一样的吗。不然目的条带哪里来的，就算引物不够特异，也不会刚好是目的条带的大小啊。我目的条带3kb，没那么容易假阳性吧。看文献很多人都写用通用引物鉴定，那如果是我这种情况，到底是转化了没？P不出条带又是什么原因呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工（0856）304求 B区 调剂
已经有3人回复
-
268求调剂
已经有8人回复
-
265求调剂
已经有14人回复
-
350 本科985求调剂，求老登收留
已经有3人回复
-
【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂
已经有9人回复
-
初试 317
已经有3人回复
-
279分求调剂 一志愿211
已经有15人回复
-
286求调剂
已经有4人回复
-
279求调剂
已经有4人回复
-
求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么电转后筛菌，然后用通用引物PCR，但是空GS115都PCR不出条带？跪求！回复！！
已经有11人回复
- 毕赤酵母ppic9k表达原理问题
已经有7人回复
- 蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证，除目的片段外还有一条带，什么原因？
已经有10人回复
- 求助毕赤酵母转化问题
已经有11人回复
- 酵母基因敲除，PCR验证遇到的问题。
已经有18人回复
- smd1168毕赤酵母转化问题
已经有20人回复
- 毕赤酵母转化后遗传霉素筛选问题
已经有14人回复
- 关于毕赤酵母G418筛选
已经有9人回复
- 菌落PCR挑菌时的条件问题
已经有10人回复
- 毕赤酵母重组子的筛选
已经有5人回复
- 真菌转化子PCR验证问题
已经有20人回复
- 毕赤酵母电转化问题求助
已经有26人回复
- 毕赤酵母表达一直不表达
已经有13人回复
- 转化后菌落pcr有目的条带，小摇长菌，再大摇不长了，求帮助~
已经有14人回复
- 关于毕赤酵母电转化
已经有10人回复
- 关于毕赤酵母gs115可否用转化化学转化
已经有6人回复
- 菌落PCR无条带
已经有19人回复
- 关于转化、菌落PCR
已经有8人回复
- 酵母阳性转化子筛选
已经有5人回复
- 毕赤酵母表达出蛋白但没有活性
已经有18人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转化
已经有22人回复
6楼2015-07-23 15:21:30
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
8楼2015-07-26 22:27:08
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
2楼2015-07-10 15:18:49
awaken2013
铜虫 (小有名气)
- 应助: 26 (小学生)
- 金币: 137.9
- 红花: 15
- 帖子: 243
- 在线: 149.6小时
- 虫号: 2854550
- 注册: 2013-12-07
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2015-07-13 23:50:09
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
4楼2015-07-15 08:17:24
evil丶zero
金虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1332.1
- 散金: 27
- 红花: 2
- 帖子: 170
- 在线: 75.3小时
- 虫号: 3302308
- 注册: 2014-07-01
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2015-07-15 11:06:38
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19457.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6586
- 在线: 2777.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
7楼2015-07-23 23:32:47
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
9楼2015-07-26 22:28:39
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
10楼2015-07-26 22:30:33
