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cuicchao

金虫 (正式写手)

[求助] 关于毕赤酵母G418筛选

请问大家一下,我做了毕赤酵母的转化,先在MD平板上长出单克隆后,人们建议从G418-YPD平板再筛选,一般是从0.5mg/ml开始筛选,同学说直接从2mg/ml开始筛选,我这样做了,但是感觉酵母长得有些慢,2天了还没动静,大家觉得这么做好么?一般大家怎么做呢?
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好心态;年轻派
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cuicchao

金虫 (正式写手)

还有,我是从单克隆板子上用牙签沾点菌涂在G418-YPD平板上的,涂的菌有点多,有什么不好?
好心态;年轻派
2楼2013-04-19 17:32:06
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晓婧happy

铜虫 (初入文坛)


cuicchao(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-26 10:42:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by cuicchao at 2013-04-19 17:32:06
还有,我是从单克隆板子上用牙签沾点菌涂在G418-YPD平板上的,涂的菌有点多,有什么不好?

请问你的G418是怎么配的啊?
3楼2013-04-26 09:03:35
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cuicchao

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 晓婧happy at 2013-04-26 09:03:35
请问你的G418是怎么配的啊?...

用纯水配的。
好心态;年轻派
4楼2013-04-26 10:38:07
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晓婧happy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cuicchao at 2013-04-26 10:38:07
用纯水配的。...

用过滤除菌吗?能用多久啊?因为我用的放几天就可能失效,抗不抗的都能长起来
5楼2013-04-26 11:05:54
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cuicchao

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 晓婧happy at 2013-04-26 11:05:54
用过滤除菌吗?能用多久啊?因为我用的放几天就可能失效,抗不抗的都能长起来...

肯定要过滤啊,配了有半个月了吧,不过刚配的就用来制备平板了
好心态;年轻派
6楼2013-04-26 18:25:17
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wpy890718

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cuicchao: 金币+9, 有帮助, 恩,从相关的说明书上看到这些能容了,谢谢! 2013-06-18 18:20:28
恩,我旁边的同学也做了这个实验,从2mg开始是有点浓度高了,可能有直接导致菌株尚未产生抗性因子而不生长。建议从0.5mg开始
7楼2013-06-18 18:18:32
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qiuqiushine

新虫 (初入文坛)

不用先做菌落PCR进行验证吗?
8楼2013-12-16 16:14:39
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cuicchao

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by qiuqiushine at 2013-12-16 16:14:39
不用先做菌落PCR进行验证吗?

是要先验证的
好心态;年轻派
9楼2013-12-19 09:51:01
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尚善若水-lyy

新虫 (初入文坛)

平板长本来就会慢一些,我还筛3mg/ml了,长得和2mg/ml,1.5mg/ml感觉没什么区别,你做转化是用电转么?
10楼2014-08-30 10:20:42
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