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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于毕赤酵母G418筛选
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cuicchao

金虫 (正式写手)

[求助] 关于毕赤酵母G418筛选

请问大家一下，我做了毕赤酵母的转化，先在MD平板上长出单克隆后，人们建议从G418-YPD平板再筛选，一般是从0.5mg/ml开始筛选，同学说直接从2mg/ml开始筛选，我这样做了，但是感觉酵母长得有些慢，2天了还没动静，大家觉得这么做好么？一般大家怎么做呢?
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好心态；年轻派
1楼 2013-04-19 17:25:57
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cuicchao

金虫 (正式写手)
还有，我是从单克隆板子上用牙签沾点菌涂在G418-YPD平板上的，涂的菌有点多，有什么不好？
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好心态；年轻派
2楼2013-04-19 17:32:06
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晓婧happy

铜虫 (初入文坛)
★
cuicchao(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-26 10:42:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by cuicchao at 2013-04-19 17:32:06
还有，我是从单克隆板子上用牙签沾点菌涂在G418-YPD平板上的，涂的菌有点多，有什么不好？

请问你的G418是怎么配的啊？
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3楼2013-04-26 09:03:35
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cuicchao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晓婧happy at 2013-04-26 09:03:35
请问你的G418是怎么配的啊？...

用纯水配的。
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好心态；年轻派
4楼2013-04-26 10:38:07
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晓婧happy

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cuicchao at 2013-04-26 10:38:07
用纯水配的。...

用过滤除菌吗？能用多久啊？因为我用的放几天就可能失效，抗不抗的都能长起来
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5楼2013-04-26 11:05:54
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cuicchao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 晓婧happy at 2013-04-26 11:05:54
用过滤除菌吗？能用多久啊？因为我用的放几天就可能失效，抗不抗的都能长起来...

肯定要过滤啊，配了有半个月了吧，不过刚配的就用来制备平板了
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好心态；年轻派
6楼2013-04-26 18:25:17
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wpy890718

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cuicchao: 金币+9, ★有帮助, 恩，从相关的说明书上看到这些能容了，谢谢！ 2013-06-18 18:20:28
恩，我旁边的同学也做了这个实验，从2mg开始是有点浓度高了，可能有直接导致菌株尚未产生抗性因子而不生长。建议从0.5mg开始
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7楼2013-06-18 18:18:32
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qiuqiushine

新虫 (初入文坛)
不用先做菌落PCR进行验证吗？
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8楼2013-12-16 16:14:39
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cuicchao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by qiuqiushine at 2013-12-16 16:14:39
不用先做菌落PCR进行验证吗？

是要先验证的
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好心态；年轻派
9楼2013-12-19 09:51:01
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尚善若水-lyy

新虫 (初入文坛)
平板长本来就会慢一些，我还筛3mg/ml了，长得和2mg/ml,1.5mg/ml感觉没什么区别，你做转化是用电转么？
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10楼2014-08-30 10:20:42
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