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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】GS115在MGY液体培养基内不生长
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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】GS115在MGY液体培养基内不生长 已有2人参与

请问大家，谢谢...

[ Last edited by pidou213 on 2010-8-10 at 16:41 ]
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见得多爱的多
1楼 2010-08-09 16:49:02
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
pidou213(金币+1):见笑了，写错了，是MGY，不知道你有什么可以帮助的么？ 2010-08-10 16:42:16
首先请教MMY培养基是什么？确定不是BMMY培养基？
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-08-09 19:57:47
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
pidou213(金币+2):高人啊！！ 2010-08-11 21:44:49
不长就对了嘛，Gs115是组氨酸缺陷型菌株，培养基中没有组氨酸当然不长。MGYH上才长。
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Thank-you，so-blue.
3楼2010-08-10 20:20:44
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pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-08-10 20:20:44:
不长就对了嘛，Gs115是组氨酸缺陷型菌株，培养基中没有组氨酸当然不长。MGYH上才长。

再请教一个问题：
鉴定Mut+和Muts有什么意义呢？
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见得多爱的多
4楼2010-08-11 21:45:30
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-12 05:45:15
pidou213(金币+2):期待你再次恢复 2010-08-13 23:42:16
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2010-08-11 21:45:30:




再请教一个问题：
鉴定Mut+和Muts有什么意义呢？

有意义啊，不同的蛋白有的Mut+表达量高，有的Muts表达量高。所以一般同时筛出这两种表型都表达看看。
另外，胞内表达适合用Muts表型表达，分泌表达适合用Mut+表型表达。
PS：亲爱的pidou213同志，鉴于你提到很多比赤酵母表达的问题，都可以在操作手册里面有详细的解答，而且我也在你这赚了太多金币了，所以推荐你下载下手册详细学习下，这样会少走很多弯路。
下载方法很简单，直接百度or google：毕赤酵母表达手册。
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Thank-you，so-blue.
5楼2010-08-11 22:20:12
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pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-08-11 22:20:12:

有意义啊，不同的蛋白有的Mut+表达量高，有的Muts表达量高。所以一般同时筛出这两种表型都表达看看。
另外，胞内表达适合用Muts表型表达，分泌表达适合用Mut+表型表达。
PS：亲爱的pidou213同志，鉴于你提到很 ...

呵呵 没关系，你能帮助我，花点金币是没关系的，酵母表达手册我倒是看过了，但是完全按照那个进行操作的话会非常麻烦。

譬如关于Muts和Mut+表型的问题，最后手册的意思是两个表型都尝试一下比较好，然后我就觉得既然都要尝试，干吗还要区分呢？

还有用载体PIC9K的时候，为什么电转完以后现在MD培养基培养，然后再进行G418浓度筛选呢/直接进行YPD+G418浓度筛选不行吗？
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见得多爱的多
6楼2010-08-13 23:41:36
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-14 07:43:04
pidou213(金币+3):谢谢 2010-08-15 23:07:20
之所以要区分，我上面也说了，一般胞内表达适合用Muts表型表达，分泌表达适合用Mut+表型表达。为了这个。
另外，之所以先用MD培养基筛选，是因为营养缺陷型筛选很准确，长出来的都是转化子，但是一般情况下认为高拷贝表达量较高，如果你的表达量不高，就可以尝试用高浓度的G418筛多拷贝了。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
7楼2010-08-14 00:30:29
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