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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助关于毕赤酵母电转抗性的问题
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轻尘紫陌

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于毕赤酵母电转抗性的问题

最近在做毕赤酵母转化，用的是pPIC9K质粒，有一个问题想请教各位大侠，就是电转后涂布的那个平板（我用的是MD平板）到底要不要加G418啊，如果是要加的话，想知道加入G418以后会不会影响到质粒的整合。。。。。
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1楼 2012-06-15 13:45:57
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nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-06-15 21:49:46
本帖内容被屏蔽
2楼2012-06-15 15:22:35
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limin2012

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电转化后度的MD板不要加，等菌落长出来后，再在含G418的平板上筛选。
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3楼2012-06-15 17:27:21
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轻尘紫陌

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nemo88 at 2012-06-15 15:22:35
理论暂时上不需要…
你用的酵母是买的还是实验室保存的？如果是自己存的，那用前有没有进行缺陷型酵母筛选…缺陷型的在md平板上是不能生长的…
从这个平板上筛选出来之后在利用不同浓度g418的ypd平板去筛选不同插 ...

哦 ，是这样啊，我们的应该是用的模式菌的，  导师之前跟我提过可不可以电转完以后直接涂布梯度抗性平板，所以我才问是不是不用加抗性的
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4楼2012-06-17 11:15:12
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轻尘紫陌

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by limin2012 at 2012-06-15 17:27:21
电转化后度的MD板不要加，等菌落长出来后，再在含G418的平板上筛选。

哦  非常感谢啊
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5楼2012-06-17 11:15:34
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nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
轻尘紫陌: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2012-06-19 12:56:18
本帖内容被屏蔽
6楼2012-06-17 14:59:50
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