| 查看: 1891 | 回复: 5 | ||
[求助]
求助：毕赤酵母电转化
|
| 各位虫友有没有用过bio-rad的电转仪电转毕赤酵母，想问下用机子的预设模式电转效果怎么样啊 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有100人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助毕赤酵母电转化问题
已经有6人回复
- 求助：毕氏酵母GS115感受态细胞的制备及转化方法
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教关于毕赤酵母表达外源基因
已经有5人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达
已经有19人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母胞外表达上清无活性，但胞内测得活性，WHY?
已经有4人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达胞外蛋白，sds电泳后看不到条带
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转化
已经有22人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达蛋白的奇怪现象
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助毕赤酵母电转化
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有20人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母电转化问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教毕赤酵母转化之后的筛选（鉴定）
已经有4人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达相关问题
已经有4人回复
gwbk
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 54
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2293.5
- 红花: 24
- 帖子: 529
- 在线: 186.9小时
- 虫号: 1320681
- 注册: 2011-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-28 18:28:27
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-28 18:28:27
|
实验室在用biorad的电转仪，没有做过毕赤酵母，做的是大肠杆菌。但是有几点经验可以参考。 1，我常用的是biorad推荐的大肠杆菌的1800V，200欧姆，25uF设置，自制感受态，没有电火花，一般会成功；使用购买的transT1，DH5a，电火花啪啪直响，但是也未必失败，至少有2次试验，都是打了电火花之后，不甘心，涂平板长出来菌，测序验证正确的，打了电火花，细菌基本上都被电死了，很少能吸收了质粒又活下来的，长出来算是幸运，长不出来那是预料之中。。。 2，使用过更高的电压甚至2500v，电击时间没有注意过，应该不会超过5ms吧。和1800转化结果没有太大区别。 试验做多了就没有这么多问题了。有一次我同学化学转化放在50℃，90s，都能长出来菌。多积累点经验，试验可以多摸索摸索，没关系的，做错了重做呗，说句不负责任的话，金子又不是你自己出，关键是学到东西。分子生物很神奇，预料不到的结果都很难说，试验不顺利，几个月干耗，试验顺利，一年的工作，个半月搞定。。。 |
2楼2011-06-28 00:16:21
3楼2011-06-28 08:35:15
biopanda
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 18.6
- 散金: 90
- 帖子: 120
- 在线: 33.5小时
- 虫号: 1260831
- 注册: 2011-04-10
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
4楼2011-06-28 13:15:31
5楼2011-06-29 10:24:29
hanhaixingyun
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 983.4
- 散金: 234
- 帖子: 387
- 在线: 80.6小时
- 虫号: 544400
- 注册: 2008-04-12
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2011-06-29 11:36:16
20