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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达相关问题 已有2人参与

使用毕赤酵母做宿主,电击转化,经MD平板和G418抗性筛选后,提取酵母基因组进行PCR检测,使用载体引物5AOX、3AOX p不出条带,而使用目的基因自身的特异性引物能够p出来,这样可以肯定是阳性重组菌吗?谢谢 
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-6 14:04
x8q4h11(金币+1,VIP+0): 1-7 08:58
那质粒做过阳性对照了吗,是不是pcr条件不合适啊,首先要确定pcr条件是合适的。利用目的基因自身特异性引物能p出来应该证明转进去了,先诱导一下看看吧。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-01-06 12:52:09
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-1-6 12:52:
那质粒做过阳性对照了吗,是不是pcr条件不合适啊,首先要确定pcr条件是合适的。利用目的基因自身特异性引物能p出来应该证明转进去了,先诱导一下看看吧。

谢谢
3楼2010-01-07 09:02:01
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可是我考虑到一个问题:若毕赤酵母体内也存在你的相似基因,若巧合的话,那可能就会出现假阳性了。
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
4楼2010-05-20 08:03:28
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qiuqiushine

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,你是提取酵母基因组进行PCR检测,那不是要提取很多个酵母基因组?是用酵母基因组提取试剂盒提取的吗?
5楼2013-12-16 16:30:12
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