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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】毕赤酵母表达相关问题
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达相关问题 已有2人参与

使用毕赤酵母做宿主，电击转化，经MD平板和G418抗性筛选后，提取酵母基因组进行PCR检测，使用载体引物5AOX、3AOX p不出条带，而使用目的基因自身的特异性引物能够p出来，这样可以肯定是阳性重组菌吗？谢谢　
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1楼 2010-01-06 12:35:55
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-6 14:04
x8q4h11(金币+1,VIP+0): 1-7 08:58
那质粒做过阳性对照了吗，是不是pcr条件不合适啊，首先要确定pcr条件是合适的。利用目的基因自身特异性引物能p出来应该证明转进去了，先诱导一下看看吧。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-01-06 12:52:09
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x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-1-6 12:52:
那质粒做过阳性对照了吗，是不是pcr条件不合适啊，首先要确定pcr条件是合适的。利用目的基因自身特异性引物能p出来应该证明转进去了，先诱导一下看看吧。

谢谢
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3楼2010-01-07 09:02:01
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可是我考虑到一个问题：若毕赤酵母体内也存在你的相似基因，若巧合的话，那可能就会出现假阳性了。
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将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
4楼2010-05-20 08:03:28
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qiuqiushine

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，你是提取酵母基因组进行PCR检测，那不是要提取很多个酵母基因组？是用酵母基因组提取试剂盒提取的吗？
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5楼2013-12-16 16:30:12
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