| 查看: 2300 | 回复: 6 | ||
guangxidaxue金虫 (小有名气)
|
[求助]
求助毕赤酵母电转化问题
|
|
酵母是GS115，载体pPIC9K，构建成功后有11KB。SacI线性化。 电转化步骤：调但菌落培养过夜，然后转接100ML YPD培养基中，OD600约1.1~1.5时收集细胞，4度离心，冰水洗二次，1M山梨醇洗一次，最后用1ML山梨醇溶，取80UL与5-10ugDNA混溶，转入0.2cm预冷电转杯中，冰浴5min！1.5kv，25μF，200Ω条件下进行电转，立即加1ML 1M山梨醇，然后涂MD板！ 在以上的条件下做了好几次了都没有长，求各位高手大侠帮帮忙！指点下。。。万分感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
285求调剂
已经有12人回复
-
求调剂
已经有6人回复
-
085600材料与化工301分求调剂院校
已经有19人回复
-
277工科求调剂
已经有11人回复
-
277求调剂 数一104分
已经有13人回复
-
304求调剂
已经有10人回复
-
336求调剂，一志愿中科大
已经有6人回复
-
071000生物学，一志愿深圳大学296分，求调剂
已经有3人回复
-
一志愿北京化工085600 310分求调剂
已经有19人回复
-
274求调剂求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于毕赤酵母电转化
已经有10人回复
- 毕赤酵母表达过程中线性化DNA去磷酸化的问题
已经有6人回复
- 求助电转化相关问题
已经有11人回复
- 求助：毕赤酵母电转化
已经有5人回复
- 毕赤酵母转化问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达
已经有19人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转化
已经有22人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达蛋白的奇怪现象
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助毕赤酵母电转化
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有20人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母电转化问题
已经有5人回复
summit_power
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 52.1
- 红花: 1
- 帖子: 32
- 在线: 17.4小时
- 虫号: 1204149
- 注册: 2011-02-16
- 专业: 生物化学
2楼2011-06-15 15:27:30
guangxidaxue
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 525.6
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 69
- 在线: 34.1小时
- 虫号: 988361
- 注册: 2010-04-03
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
3楼2011-06-20 10:05:24
summit_power
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 52.1
- 红花: 1
- 帖子: 32
- 在线: 17.4小时
- 虫号: 1204149
- 注册: 2011-02-16
- 专业: 生物化学
4楼2011-06-21 22:26:10
summit_power
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 52.1
- 红花: 1
- 帖子: 32
- 在线: 17.4小时
- 虫号: 1204149
- 注册: 2011-02-16
- 专业: 生物化学
5楼2011-06-21 22:29:07
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2011-07-17 18:14:59
twisty
木虫 (正式写手)
newer
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 2707.6
- 散金: 29
- 帖子: 365
- 在线: 70小时
- 虫号: 1277221
- 注册: 2011-04-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
7楼2012-03-29 07:00:47
5