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求助关于毕赤酵母电转抗性的问题
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轻尘紫陌
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[
求助
]
求助关于毕赤酵母电转抗性的问题
最近在做毕赤酵母转化,用的是pPIC9K质粒,有一个问题想请教各位大侠,就是电转后涂布的那个平板(我用的是MD平板)到底要不要加G418啊,如果是要加的话,想知道加入G418以后会不会影响到质粒的整合。。。。。
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1楼
2012-06-15 13:45:57
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limin2012
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电转化后度的MD板不要加,等菌落长出来后,再在含G418的平板上筛选。
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3楼
2012-06-15 17:27:21
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nemo88
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2012-06-15 15:22:35
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轻尘紫陌
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2楼
:
Originally posted by
nemo88
at 2012-06-15 15:22:35
理论暂时上不需要…
你用的酵母是买的还是实验室保存的?如果是自己存的,那用前有没有进行缺陷型酵母筛选…缺陷型的在md平板上是不能生长的…
从这个平板上筛选出来之后在利用不同浓度g418的ypd平板去筛选不同插 ...
哦 ,是这样啊,我们的应该是用的模式菌的, 导师之前跟我提过可不可以电转完以后直接涂布梯度抗性平板,所以我才问是不是不用加抗性的
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4楼
2012-06-17 11:15:12
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3楼
:
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limin2012
at 2012-06-15 17:27:21
电转化后度的MD板不要加,等菌落长出来后,再在含G418的平板上筛选。
哦 非常感谢啊
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5楼
2012-06-17 11:15:34
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