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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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轻尘紫陌

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于毕赤酵母电转抗性的问题

最近在做毕赤酵母转化,用的是pPIC9K质粒,有一个问题想请教各位大侠,就是电转后涂布的那个平板(我用的是MD平板)到底要不要加G418啊,如果是要加的话,想知道加入G418以后会不会影响到质粒的整合。。。。。
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nemo88

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-06-15 21:49:46
本帖内容被屏蔽

2楼2012-06-15 15:22:35
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limin2012

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电转化后度的MD板不要加,等菌落长出来后,再在含G418的平板上筛选。
3楼2012-06-15 17:27:21
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轻尘紫陌

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by nemo88 at 2012-06-15 15:22:35
理论暂时上不需要…
你用的酵母是买的还是实验室保存的?如果是自己存的,那用前有没有进行缺陷型酵母筛选…缺陷型的在md平板上是不能生长的…
从这个平板上筛选出来之后在利用不同浓度g418的ypd平板去筛选不同插 ...

哦 ,是这样啊,我们的应该是用的模式菌的,  导师之前跟我提过可不可以电转完以后直接涂布梯度抗性平板,所以我才问是不是不用加抗性的
4楼2012-06-17 11:15:12
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轻尘紫陌

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by limin2012 at 2012-06-15 17:27:21
电转化后度的MD板不要加,等菌落长出来后,再在含G418的平板上筛选。

哦  非常感谢啊
5楼2012-06-17 11:15:34
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nemo88

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
轻尘紫陌: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2012-06-19 12:56:18
本帖内容被屏蔽

6楼2012-06-17 14:59:50
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