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落明逐暗

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达载体的选择

我现在要做一个蛋白胞内部分的表达，无二硫键，无糖基化位点，仅一个磷酸化位点，大小在36KD的样子，DNA片段将近1kb。想选用毕赤酵母作宿主菌，分泌表达，但是载体上面选择遇到了一些难题，主要是想问问各位高手，有没有像大肠杆菌的pMAL-c4x载体那样自己就带MBP蛋白的毕赤酵母表达载体啊？这样我就不用自己再加一段MBP的基因了。
望各位不吝指教啊！
注：这个蛋白表达力求越简单越快越方便纯化，因为只是作为后续实验的底物。
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1楼 2011-01-14 09:57:51
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DH5a

银虫 (小有名气)
落明逐暗(金币+1): 多谢。已经选择pPICZαA了~ 2011-03-01 14:43:44
你若想要带MBP必须自己把基因连上，目前商品化的没有这样的载体。
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2楼2011-01-15 15:15:46
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)
落明逐暗(金币+1): 呃，那还涉及到偏好性问题。反正我的基因是直接合成，只在选载体的问题而已。。。 2011-03-01 14:44:48
直接把大肠表达载体上的MBP+目的片段pcr，连接到毕赤酵母表达载体上， 行么？
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3楼2011-01-15 15:22:41
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86269480

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
楼主在啊，非得用MBP吗？
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4楼2011-09-14 14:42:36
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落明逐暗

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 86269480 at 2011-09-14 14:42:36:
楼主在啊，非得用MBP吗？

不是。现在已经改了。大肠表达成功，就不用酵母了。
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5楼2011-09-15 09:34:00
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