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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问一个内参引物问题，谢谢！
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吕素娟

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问一个内参引物问题，谢谢！ 已有2人参与

我做的是普通PCR，目的片段是1500bp，但是一直跑不出来，想找个内参看看到底是引物的问题，还是模版及PCR的问题，我看网上都是qPCR的内参引物，最后扩出来都是几百，我想找个扩出来大小也是1500左右的内参，哪位大神可以帮忙，多谢啦！！
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1楼 2015-06-26 20:26:58
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吕素娟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-06-27 09:37:58
普通PCR不需要内参，而且就算你模板里有某个片段可以作为内参也不能用同样的引物来P
要是想练习下PCR，随便找个质粒P一下吧

主要是现在P不出来东西 ，我想设计内参是为了看看哪里出了问题，如果差不多大小的内参能P出来，应该能说明模版和PCR没有问题吧
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3楼2015-06-27 20:46:26
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-27 22:53:13
普通PCR不需要内参，而且就算你模板里有某个片段可以作为内参也不能用同样的引物来P
要是想练习下PCR，随便找个质粒P一下吧
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2015-06-27 09:37:58
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的引物应该是有问题，重新设计一下。另外qPCR的内参引物扩出来都是50-150，扩出来大小超过200bp的内参的都不行
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4楼2015-09-16 14:54:26
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