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吕素娟

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问一个内参引物问题,谢谢! 已有2人参与

我做的是普通PCR,目的片段是1500bp,但是一直跑不出来,想找个内参看看到底是引物的问题,还是模版及PCR的问题,我看网上都是qPCR的内参引物,最后扩出来都是几百,我想找个扩出来大小也是1500左右的内参,哪位大神可以帮忙,多谢啦!!
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-27 22:53:13
普通PCR不需要内参,而且就算你模板里有某个片段可以作为内参也不能用同样的引物来P
要是想练习下PCR,随便找个质粒P一下吧
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2015-06-27 09:37:58
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吕素娟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-06-27 09:37:58
普通PCR不需要内参,而且就算你模板里有某个片段可以作为内参也不能用同样的引物来P
要是想练习下PCR,随便找个质粒P一下吧

主要是现在P不出来东西 ,我想设计内参是为了看看哪里出了问题,如果差不多大小的内参能P出来,应该能说明模版和PCR没有问题吧
3楼2015-06-27 20:46:26
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的引物应该是有问题,重新设计一下。另外qPCR的内参引物扩出来都是50-150,扩出来大小超过200bp的内参的都不行
4楼2015-09-16 14:54:26
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