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Hzhenping

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[求助] 求助！！！WB内参、抗体的问题。已有1人参与

各位虫友，本人是WB新手。
我们课题组，没有谁做过WB的，之前有一个成员做过，然后就由他请购了试剂，后来他离开了，这个实验就我们自己摸索了。。。但是至今为止我们仍没成功做出内参GAPDH的条带来。目的蛋白条带可以出来，我怀疑是抗体结合不上，我们的一抗是rabbit anti rat的，二抗是goat anti rabbit,内参GAPDH是兔抗小鼠（GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin）。这样是否会结合不上？请高手指点！如果真结合不上，我该怎么办？
万分感谢！

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1楼 2014-01-07 00:28:04

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-07 08:44:54
Hzhenping: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-01-07 23:39:45

内参二抗用的不对。
GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin
这句话的意思是做抗体用的抗原GADPH是来自兔子，抗体本身是鼠源的单抗，所以二抗应该选抗鼠的，如山羊抗鼠。

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2楼2014-01-07 01:03:06

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Hzhenping

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2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 01:03:06
内参二抗用的不对。
GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin
这句话的意思是做抗体用的抗原GADPH是来自兔子，抗体本身是鼠源的单抗，所以二抗应该选抗鼠的，如 ...

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3楼2014-01-07 23:40:15

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