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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于WB的内参问题
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Hzhenping

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于WB的内参问题 已有1人参与

各位虫友，本人最近在做WB实验，初次接触，疑问较多。。。
对于内参GAPDH什么时候使用和怎么使用，我询问了周围做过WB的朋友，有说直接选择样品蛋白的条带作为内参的，转膜后直接剪目的条带的膜和内参所在分子量的膜，分别孵育一抗和GAPDH，然后孵育相同二抗。
有说直接用GAPDH上样的。。。
查阅了论坛上的资料都没见提过内参的。。。我也不知道孰对孰错或者说哪个更好，请虫友们支支招。
另外，我们买的Santa Cruz 的内参GAPDH只有一小管试剂没有说明书。我在网上查阅了它的说明书，只说了稀释比例，没有说用什么稀释，我看它的组成，有PBS溶液，用PBS稀释可以吗？有朋友说可以用TBST稀释。really?
先谢过了！
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1楼 2013-12-30 23:20:28
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-31 12:43:13
Hzhenping: 金币+10, ★有帮助, 如果回答得更全面就好了。 2014-01-01 11:42:30
内参当然是样品里面的GAPDH。第一种是正确做法，第二种是造假做法。
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Hzhenping
2楼2013-12-31 12:10:35
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Hzhenping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-31 12:10:35
内参当然是样品里面的GAPDH。第一种是正确做法，第二种是造假做法。

谢谢您的回复!

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3楼2014-01-01 11:41:13
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Hzhenping

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-31 12:10:35
内参当然是样品里面的GAPDH。第一种是正确做法，第二种是造假做法。

还有花，哈哈。

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4楼2014-01-01 11:43:24
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