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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RTPCR 内参
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longtian1755

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RTPCR 内参 已有2人参与

请教一下 做RTPCR时，内参引物与基因特异性引物是加在同一PCR体系当中吗？还是内参与目的基因分别来PCR呢，体系大小与循环一样。请位高手指教各 Sample Text
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共同学习 做实验牛人
1楼 2010-08-25 10:33:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
都可以~~RT-PCR本来就不是什么很精确的东西
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2楼2010-08-25 10:44:57
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longtian1755

银虫 (初入文坛)
好的 谢谢啊 不过作为文章上的数据 一般会倾向于哪个呢
还有我看到一些图片内参与目的基因是在同一泳道上 它们在PCR的时候是在同一体系，还是分别PCR之后加在同一泳道上的呢 请再次指教 非常感谢
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共同学习 做实验牛人
3楼2010-08-25 12:07:28
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~ 2010-08-25 12:35:07
引用回帖:
Originally posted by longtian1755 at 2010-08-25 12:07:28:
好的 谢谢啊 不过作为文章上的数据 一般会倾向于哪个呢
还有我看到一些图片内参与目的基因是在同一泳道上 它们在PCR的时候是在同一体系，还是分别PCR之后加在同一泳道上的呢 请再次指教 非常感谢

我感觉，没有任何的偏好性
内参和目的基因在一起，均一性更好
但是难免会出现竞争，况且，内参因为表达量很高一般很快达到平台期，所以定量不大准
如果分开的话就可以分别控制，但难保体系的均一性
其实只要能看出趋势就好了
真要做定量，还是得借助实时定量
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4楼2010-08-25 12:23:35
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longtian1755

银虫 (初入文坛)
非常感谢 呵呵 有问题再请教
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共同学习 做实验牛人
5楼2010-08-26 09:49:54
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