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longtian1755

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RTPCR 内参已有2人参与

请教一下 做RTPCR时,内参引物与基因特异性引物是加在同一PCR体系当中吗?还是内参与目的基因分别来PCR呢,体系大小与循环一样。请位高手指教各 Sample Text
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~ 2010-08-25 12:35:07
引用回帖:
Originally posted by longtian1755 at 2010-08-25 12:07:28:
好的 谢谢啊 不过作为文章上的数据 一般会倾向于哪个呢
还有我看到一些图片内参与目的基因是在同一泳道上 它们在PCR的时候是在同一体系,还是分别PCR之后加在同一泳道上的呢 请再次指教 非常感谢

我感觉,没有任何的偏好性
内参和目的基因在一起,均一性更好
但是难免会出现竞争,况且,内参因为表达量很高一般很快达到平台期,所以定量不大准
如果分开的话就可以分别控制,但难保体系的均一性
其实只要能看出趋势就好了
真要做定量,还是得借助实时定量
4楼2010-08-25 12:23:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
都可以~~RT-PCR本来就不是什么很精确的东西
2楼2010-08-25 10:44:57
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longtian1755

银虫 (初入文坛)

好的 谢谢啊 不过作为文章上的数据 一般会倾向于哪个呢
还有我看到一些图片内参与目的基因是在同一泳道上 它们在PCR的时候是在同一体系,还是分别PCR之后加在同一泳道上的呢 请再次指教 非常感谢
共同学习 做实验牛人
3楼2010-08-25 12:07:28
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longtian1755

银虫 (初入文坛)

非常感谢 呵呵 有问题再请教
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5楼2010-08-26 09:49:54
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