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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于WB曝光时发现的问题
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renke985

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于WB曝光时发现的问题

请教各位高人：
    我做WB曝光时，发现内参条带做得很漂亮，但是目的条带整条膜上全是荧光，条带都看不见，爆出来后整条膜都是暗色的，因为是同时做的，条件也都一样，现在摸不清楚是什么原因，请有经验的朋友指点指点迷津！ 非常感谢！
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1楼 2013-03-22 01:21:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-22 07:40:04
renke985: 金币+2, ★有帮助 2013-03-22 09:59:47
可能是一抗浓度太高，洗膜不充分。对于好的一抗，洗得不很充分也能得到很好的结果，对于不是很好的一抗，最好洗得尽量充分。
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2楼2013-03-22 01:38:27
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石头2011

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-23 08:12:58
应该是你一抗的特异性问题，可以降低上样量，适当延长孵育时间，必要时一抗二抗时加点BSA
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

renke985
静~
3楼2013-03-22 08:08:36
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renke985

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 石头2011 at 2013-03-22 08:08:36
应该是你一抗的特异性问题，可以降低上样量，适当延长孵育时间，必要时一抗二抗时加点BSA

谢谢，我会试着改下条件的：）
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4楼2013-03-22 10:02:44
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)
一般黑膜都是抗体浓度过高的原因；

但也有莫名的
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5楼2013-03-24 00:09:02
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