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renke985

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于WB曝光时发现的问题

请教各位高人:
    我做WB曝光时,发现内参条带做得很漂亮,但是目的条带整条膜上全是荧光,条带都看不见,爆出来后整条膜都是暗色的,因为是同时做的,条件也都一样,现在摸不清楚是什么原因,请有经验的朋友指点指点迷津! 非常感谢!
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石头2011

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-23 08:12:58
应该是你一抗的特异性问题,可以降低上样量,适当延长孵育时间,必要时一抗二抗时加点BSA

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

静~
3楼2013-03-22 08:08:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-22 07:40:04
renke985: 金币+2, 有帮助 2013-03-22 09:59:47
可能是一抗浓度太高,洗膜不充分。对于好的一抗,洗得不很充分也能得到很好的结果,对于不是很好的一抗,最好洗得尽量充分。
2楼2013-03-22 01:38:27
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renke985

银虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 石头2011 at 2013-03-22 08:08:36
应该是你一抗的特异性问题,可以降低上样量,适当延长孵育时间,必要时一抗二抗时加点BSA

谢谢,我会试着改下条件的:)
4楼2013-03-22 10:02:44
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)

一般黑膜都是抗体浓度过高的原因;

但也有莫名的
5楼2013-03-24 00:09:02
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