应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助！！！WB内参、抗体的问题。
51/1返回列表
查看: 4285  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Hzhenping

新虫 (小有名气)

[求助] 求助！！！WB内参、抗体的问题。 已有1人参与

各位虫友，本人是WB新手。
我们课题组，没有谁做过WB的，之前有一个成员做过，然后就由他请购了试剂，后来他离开了，这个实验就我们自己摸索了。。。但是至今为止我们仍没成功做出内参GAPDH的条带来。目的蛋白条带可以出来，我怀疑是抗体结合不上，我们的一抗是rabbit anti rat的，二抗是goat anti rabbit,内参GAPDH是兔抗小鼠（GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin）。这样是否会结合不上？请高手指点！如果真结合不上，我该怎么办？
万分感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-07 00:28:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hzhenping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-08 01:41:12
二抗的选择要根据一抗的来源。你的目的蛋白的一抗不是兔源的吗？你应该用抗兔的二抗。...

嗯嗯，谢谢！我们准备换一个内参试试。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-09 22:25:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-07 08:44:54
Hzhenping: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-01-07 23:39:45
内参二抗用的不对。
GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin
这句话的意思是做抗体用的抗原GADPH是来自兔子，抗体本身是鼠源的单抗，所以二抗应该选抗鼠的，如山羊抗鼠。
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-07 01:03:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hzhenping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 01:03:06
内参二抗用的不对。
GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin
这句话的意思是做抗体用的抗原GADPH是来自兔子，抗体本身是鼠源的单抗，所以二抗应该选抗鼠的，如 ...

谢谢您的回复！
回复此楼
3楼2014-01-07 23:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hzhenping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 01:03:06
内参二抗用的不对。
GAPDH is a mouse monoclonal antibody raised against GAPDH from muscle of rabbit origin
这句话的意思是做抗体用的抗原GADPH是来自兔子，抗体本身是鼠源的单抗，所以二抗应该选抗鼠的，如 ...

我还想问一下，如果内参和目的蛋白都用相同的二抗可以吗？
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-07 23:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭