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chenjunhai

木虫 (小有名气)

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[求助] 简并引物PCR,结果有几条非特异条带已有1人参与

如题
简并引物PCR,结果有几条非特异条带，而且最亮的不是目的条带。引物的GC%在65%-80%之间。怎么办？

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1楼2015-06-17 16:45:22

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

好歹目的条带出来了，试着优化一下体系看看，提高退火温度，使用高特异性试剂盒如特异性高的热启动酶等等扩增，如果最亮的条带小于100bp的话就是引物二聚体，不用管它了

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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

2楼2015-06-18 10:20:40

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折红兵

新虫 (初入文坛)

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你好，我想问一下你的pcr体系。我最近也在做。但是一直出不来带

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3楼2016-07-07 17:12:18

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