应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 转化后培养基上的单菌落怎么那么少，还有卫星菌落
121/2返回列表12下一页
查看: 5851  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)

[交流] 转化后培养基上的单菌落怎么那么少，还有卫星菌落 已有6人参与

转化后，在有氨苄青霉素的LB培养基上培养，一个板上只有几个菌落，还有一部分是卫星菌落，有的说是放在培养箱里久了就长成了卫星菌落，可有的说放再久也不会长成卫星菌落，如果是卫星菌落说是可能是污染的。一个板上不怎么也应该有300个单菌落吗？我的怎么只有几个。PCR后发现是我要的1600pb，但我怕是污染的。是不是链接的问题，时间短，效率低，只连接上了一小部分才出现这种情况啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-09 22:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shiqili471

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落PCR筛出阳性否，如果能做出来，应该没啥问题，只是转化效率低。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-06-10 19:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
既然已经成功得到阳性转化菌，为什么还要再做？

氨苄青霉素的抗性基因编码一个酶，被阳性转化菌分泌到胞外将菌所在地方的氨苄青霉素的酰胺环切开，培养的时间越久，酶扩散的范围越大，平板上的氨苄青霉素被破坏得就越多。氨苄青霉素抑制了阴性转化菌的生长，久了之后自然就会有阴性菌在阳性菌的周围长，形成卫星菌落了。

没必要担心
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2015-06-11 03:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2015-06-11 03:31:41
既然已经成功得到阳性转化菌，为什么还要再做？

氨苄青霉素的抗性基因编码一个酶，被阳性转化菌分泌到胞外将菌所在地方的氨苄青霉素的酰胺环切开，培养的时间越久，酶扩散的范围越大，平板上的氨苄青霉素被破坏得 ...

谢谢你，说的很明白，我懂了哦
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2015-06-12 13:36:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tama二等兵

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们lb对应抗生素加量为千分之一，氨苄青霉素是抑菌不是杀菌，所以时间长了会有杂菌（小的卫星菌），挑单克隆时挑大的就好，长斑少除了是感受态效价不高，还有就是转化效率不高，很正常，前几天做top10,一百二十个培养皿只长了30多个，一死死一批，建议用感受态时同时做个阴性对照
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2015-06-12 17:17:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你涂板是怎么涂的，转化后直接涂布还是离心涂布的，或者涂布的量多大，连接一般连大概半小时就ok，
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-09 22:11:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a13515517892 at 2015-06-09 22:11:25
请问你涂板是怎么涂的，转化后直接涂布还是离心涂布的，或者涂布的量多大，连接一般连大概半小时就ok，

直接涂板的，一个板加入了100微升
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-09 23:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱琪琪吉子77 at 2015-06-09 23:58:49
直接涂板的，一个板加入了100微升...

如果直接涂布的斑少，可以离心涂布
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-10 08:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MrFat

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
氨苄在37度24小时肯定失效了，会长卫星菌落的～

你的阳性菌应该没问题～重新再新的氨卞板上划个线，长6-8小时再用～
赞一下 回复此楼
6楼2015-06-10 19:15:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zliean

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
氨苄培养超过12小时 氨苄慢慢失效就有卫星菌 ，12小时内的菌落是你的目的菌   再者你感受态不太好  重做把
赞一下 回复此楼
7楼2015-06-10 21:15:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱琪琪吉子77

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zliean at 2015-06-10 21:15:43
氨苄培养超过12小时 氨苄慢慢失效就有卫星菌 ，12小时内的菌落是你的目的菌   再者你感受态不太好  重做把

谢谢啦
回复此楼
8楼2015-06-11 00:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 爱琪琪吉子77 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +6 February_Feb 2026-03-01 8/400 2026-03-01 15:28 by YYYYX1234
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 290求调剂 +8 材料专硕调剂； 2026-02-28 9/450 2026-03-01 12:46 by 闭眼看蓝天
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考研] 0856求调剂285 +6 吕仔龙 2026-02-28 6/300 2026-03-01 10:03 by wang_dand
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭