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挑取单菌落的问题 已有4人参与
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挑取单菌落到试管中摇菌，我们实验室用的是挑取单菌落到5ml左右YEB液体培养基的试管中。配YEB的时候一般都是配制在50ml锥形瓶中，之后挑取单菌落的话只用5ml左右（师兄说也还可以多加点，都可以），那各位加抗生素是加到50ml的液体培养基中混匀后再转到试管中5ml左右的YEB液体培养基，还是直接量取5ml的YEB培养基到试管中再加入抗生素？要是先加抗生素再转移之后会剩下很多YEB液体培养基，如果里面加了抗生素的话也相当于浪费了很多抗生素。我又问了师兄说加了抗生素的液体培养基可以保存吗，他说一周左右就失效了，只能没用完的就倒了，我感觉好浪费哦！我们实验室都是这么做的，请问各位虫友们都是怎么做的？ [ Last edited by yangsirun on 2012-4-11 at 18:25 ] |
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zhaohq1209
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如果先分装培养基再加抗生素的话，由于加入的抗生素量少，会造成误差，但一般有点误差对细菌生长的影响不会很大，我一般都是分装为5ml以后再加抗生素。 如果近期用的抗性培养基比较多的话，也可以事先加到整体的培养基中。 抗生素失效的问题：这还得看抗生素的种类。比如kan就没有关系，甚至高压灭菌也不会失效。最常见失效的是氨苄青霉素，一般都现用现价。而且在做转化时，培养时间过长时氨苄平板上会形成卫星菌落，所以我们现在一般都尽量避免使用amp。 |
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