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yangsirun

银虫 (小有名气)

[交流] 挑取单菌落的问题 已有4人参与

挑取单菌落到试管中摇菌,我们实验室用的是挑取单菌落到5ml左右YEB液体培养基的试管中。配YEB的时候一般都是配制在50ml锥形瓶中,之后挑取单菌落的话只用5ml左右(师兄说也还可以多加点,都可以),那各位加抗生素是加到50ml的液体培养基中混匀后再转到试管中5ml左右的YEB液体培养基,还是直接量取5ml的YEB培养基到试管中再加入抗生素?要是先加抗生素再转移之后会剩下很多YEB液体培养基,如果里面加了抗生素的话也相当于浪费了很多抗生素。我又问了师兄说加了抗生素的液体培养基可以保存吗,他说一周左右就失效了,只能没用完的就倒了,我感觉好浪费哦!我们实验室都是这么做的,请问各位虫友们都是怎么做的?

[ Last edited by yangsirun on 2012-4-11 at 18:25 ]
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生命的本质在于运动,运动是身心的运动。
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+3, 鼓励交流! 2012-04-11 18:59:56
mengfei8336: 金币+2, 谢谢您对小木虫的关注~ 2012-04-11 19:09:51
如果先分装培养基再加抗生素的话,由于加入的抗生素量少,会造成误差,但一般有点误差对细菌生长的影响不会很大,我一般都是分装为5ml以后再加抗生素。

如果近期用的抗性培养基比较多的话,也可以事先加到整体的培养基中。

抗生素失效的问题:这还得看抗生素的种类。比如kan就没有关系,甚至高压灭菌也不会失效。最常见失效的是氨苄青霉素,一般都现用现价。而且在做转化时,培养时间过长时氨苄平板上会形成卫星菌落,所以我们现在一般都尽量避免使用amp。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
2楼2012-04-11 18:41:19
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 看来毕业快忙完了吧,哈哈 2012-04-11 20:43:35
直接往5ml中添加相应比例的抗生素即可。。。
节约,准确为原则。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2012-04-11 19:08:53
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yangsirun

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-04-11 18:41:19:
如果先分装培养基再加抗生素的话,由于加入的抗生素量少,会造成误差,但一般有点误差对细菌生长的影响不会很大,我一般都是分装为5ml以后再加抗生素。

如果近期用的抗性培养基比较多的话,也可以事先加到整体 ...

受教了,多谢
生命的本质在于运动,运动是身心的运动。
4楼2012-04-11 21:56:41
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yangsirun

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 天使托 at 2012-04-11 19:08:53:
直接往5ml中添加相应比例的抗生素即可。。。
节约,准确为原则。。。

多谢,我当时就主张节约,还是能节约就节约。把实验室的东西真正的当成自己的。
生命的本质在于运动,运动是身心的运动。
5楼2012-04-11 21:59:02
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aoaoshch

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主可以把抗生素稀释一下使用,也就是另分装一个小管,减少移液时的误差。抗生素浪费了多可惜啊,特别是很贵的种类。
6楼2012-04-12 18:10:11
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yangsirun

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by aoaoshch at 2012-04-12 18:10:11:
楼主可以把抗生素稀释一下使用,也就是另分装一个小管,减少移液时的误差。抗生素浪费了多可惜啊,特别是很贵的种类。

恩,我们的抗生素母液用的是50mg/ml的,你们用的时候稀释到多少了?
生命的本质在于运动,运动是身心的运动。
7楼2012-04-12 18:17:00
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bigpalewolf

金虫 (正式写手)


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请问什么叫卫星菌落!?
8楼2012-04-13 00:21:25
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aoaoshch

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流,欢迎常来哦 2012-04-13 14:16:46
引用回帖:
7楼: Originally posted by yangsirun at 2012-04-12 18:17:00:
恩,我们的抗生素母液用的是50mg/ml的,你们用的时候稀释到多少了?

氨苄青霉素工作浓度是100mg/ml,硫酸卡那霉素工作浓度是50mg/ml,都是配成一般浓度使用。向小体积培养液里添加时,可以稀释十倍。主要是为了移液体积准确,体积太少了都在吸头里打不出来,必须把吸头插进培养液才打干净,这时易造成污染,如果往试管里加都接触不到液面。
具体情况具体分析嘛,稀释时不都是用无菌水哈,有的要用特定溶液。
9楼2012-04-13 09:43:25
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