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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 挑取单菌落的问题
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yangsirun

银虫 (小有名气)

[交流] 挑取单菌落的问题 已有4人参与

挑取单菌落到试管中摇菌，我们实验室用的是挑取单菌落到5ml左右YEB液体培养基的试管中。配YEB的时候一般都是配制在50ml锥形瓶中，之后挑取单菌落的话只用5ml左右（师兄说也还可以多加点，都可以），那各位加抗生素是加到50ml的液体培养基中混匀后再转到试管中5ml左右的YEB液体培养基，还是直接量取5ml的YEB培养基到试管中再加入抗生素？要是先加抗生素再转移之后会剩下很多YEB液体培养基，如果里面加了抗生素的话也相当于浪费了很多抗生素。我又问了师兄说加了抗生素的液体培养基可以保存吗，他说一周左右就失效了，只能没用完的就倒了，我感觉好浪费哦！我们实验室都是这么做的，请问各位虫友们都是怎么做的？

[ Last edited by yangsirun on 2012-4-11 at 18:25 ]
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生命的本质在于运动，运动是身心的运动。
1楼 2012-04-11 18:24:31
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+3, 鼓励交流！ 2012-04-11 18:59:56
mengfei8336: 金币+2, 谢谢您对小木虫的关注~ 2012-04-11 19:09:51
如果先分装培养基再加抗生素的话，由于加入的抗生素量少，会造成误差，但一般有点误差对细菌生长的影响不会很大，我一般都是分装为5ml以后再加抗生素。

如果近期用的抗性培养基比较多的话，也可以事先加到整体的培养基中。

抗生素失效的问题：这还得看抗生素的种类。比如kan就没有关系，甚至高压灭菌也不会失效。最常见失效的是氨苄青霉素，一般都现用现价。而且在做转化时，培养时间过长时氨苄平板上会形成卫星菌落，所以我们现在一般都尽量避免使用amp。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
2楼2012-04-11 18:41:19
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
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西瓜: 金币+2, 看来毕业快忙完了吧，哈哈 2012-04-11 20:43:35
直接往5ml中添加相应比例的抗生素即可。。。
节约，准确为原则。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2012-04-11 19:08:53
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yangsirun

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-04-11 18:41:19:
如果先分装培养基再加抗生素的话，由于加入的抗生素量少，会造成误差，但一般有点误差对细菌生长的影响不会很大，我一般都是分装为5ml以后再加抗生素。

如果近期用的抗性培养基比较多的话，也可以事先加到整体 ...

受教了，多谢
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生命的本质在于运动，运动是身心的运动。
4楼2012-04-11 21:56:41
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yangsirun

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天使托 at 2012-04-11 19:08:53:
直接往5ml中添加相应比例的抗生素即可。。。
节约，准确为原则。。。

多谢，我当时就主张节约，还是能节约就节约。把实验室的东西真正的当成自己的。
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生命的本质在于运动，运动是身心的运动。
5楼2012-04-11 21:59:02
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aoaoshch

木虫 (小有名气)
★
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楼主可以把抗生素稀释一下使用，也就是另分装一个小管，减少移液时的误差。抗生素浪费了多可惜啊，特别是很贵的种类。
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6楼2012-04-12 18:10:11
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yangsirun

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by aoaoshch at 2012-04-12 18:10:11:
楼主可以把抗生素稀释一下使用，也就是另分装一个小管，减少移液时的误差。抗生素浪费了多可惜啊，特别是很贵的种类。

恩，我们的抗生素母液用的是50mg/ml的，你们用的时候稀释到多少了？
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生命的本质在于运动，运动是身心的运动。
7楼2012-04-12 18:17:00
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bigpalewolf

金虫 (正式写手)
★
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请问什么叫卫星菌落！？
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8楼2012-04-13 00:21:25
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aoaoshch

木虫 (小有名气)
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流，欢迎常来哦 2012-04-13 14:16:46
引用回帖:
7楼: Originally posted by yangsirun at 2012-04-12 18:17:00:
恩，我们的抗生素母液用的是50mg/ml的，你们用的时候稀释到多少了？

氨苄青霉素工作浓度是100mg/ml，硫酸卡那霉素工作浓度是50mg/ml，都是配成一般浓度使用。向小体积培养液里添加时，可以稀释十倍。主要是为了移液体积准确，体积太少了都在吸头里打不出来，必须把吸头插进培养液才打干净，这时易造成污染，如果往试管里加都接触不到液面。
具体情况具体分析嘛，稀释时不都是用无菌水哈，有的要用特定溶液。
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9楼2012-04-13 09:43:25
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