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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何判定分离处理的菌落是纯的？
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hnhmzhong

禁虫 (小有名气)
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1楼 2012-02-28 10:15:52
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necilyx

金虫 (正式写手)

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hnhmzhong(金币+3): ★有帮助 2012-02-28 12:26:15
其实出现但菌落基本可以确定较纯，但为保险，反复接种划线三到四块板，如果还是可以长出同一种单个菌落，就是纯了~~
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聪明才智要为意外做准备~~
2楼2012-02-28 10:51:41
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girlfisher

金虫 (小有名气)

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hnhmzhong(金币+2): 2012-02-28 12:26:24
原则上无法绝对判定，凭经验95%判断
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3楼2012-02-28 12:06:43
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gywyl1977

木虫 (正式写手)

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hnhmzhong(金币+2): 2012-02-28 12:26:31
hnhmzhong(金币+1): ★有帮助 2012-02-28 12:27:39
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-29 11:32:16
你说的纯不纯是指同源重组后想分离出突变株还是指仅仅想从保藏的菌种中获得由单一的菌形成的菌落？划线是不保险的，特别是对于那些有粘连的菌。我们是把菌液做梯度稀释，即10的2次方。4次方和6次方。。。，然后涂板，找最稀浓度涂板后能长出菌落的板上挑菌鉴定。
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4楼2012-02-28 12:14:39
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hnhmzhong

禁虫 (小有名气)
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5楼2012-02-28 12:27:25
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gywyl1977

木虫 (正式写手)

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zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-29 11:32:08
明白你的意思了。这样的话，一般的反复划线是可以分离出单菌的。不放心的话，把你认为的单菌划线分离后再挑取若干个单菌分别发酵，用色谱测定产物，看主要的几个产物色谱峰是否一致。你可以看一下这方面的文献，从环境中筛选有价值的细菌的文献很多的。
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6楼2012-02-28 12:50:05
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wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
4楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-02-28 12:14:39:
你说的纯不纯是指同源重组后想分离出突变株还是指仅仅想从保藏的菌种中获得由单一的菌形成的菌落？划线是不保险的，特别是对于那些有粘连的菌。我们是把菌液做梯度稀释，即10的2次方。4次方和6次方。。。，然后涂 ...

稀释涂平板不是一样的道理么？划线分不出来的话稀释一样分不出来的，要粘连也不会因为稀释分开的。不要想太多，划线法很科学的。多次划线绝对可以分出纯菌株的。
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7楼2012-02-28 14:14:59
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zjutboss

银虫 (小有名气)

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hnhmzhong(金币+2): 2012-02-28 22:28:18
显微镜观察下形态，或者做下分子鉴定，菌落PCR、电泳观察条带数
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8楼2012-02-28 15:09:54
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shangyufang

木虫 (小有名气)

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划线分离，反复几次结果可信度较高。
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sunny
9楼2012-02-28 22:13:34
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-29 11:32:03
就行楼上所说的那样，划线分离或稀释涂布有单菌落出现基本上可以认为是纯的，再配合下染色，做个形态观察，形态一致就没问题了
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10楼2012-02-29 09:12:23
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