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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何获得单菌落
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njxmhl

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何获得单菌落 已有5人参与

本人在做黑曲霉和木霉平板酶活水解圈时，发现黑曲霉和木霉在平板上长成一片，不是单菌落，特向各位请教，如何才能黑曲霉和木霉在平板上长成单菌落？
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1楼 2010-08-09 07:45:29
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mmshuo

霉菌的分离有点小烦啊，不太好弄清

2楼2010-08-09 07:52:01
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yrq287

金虫 (正式写手)
划线了吗？要不不通浓度稀释涂布？
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牛年有吉利
3楼2010-08-09 08:04:32
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烟大考研

金虫 (正式写手)

可以采用三点接种法

★ ★ ★
看天(金币+3):鼓励 2010-08-09 08:32:35
njxmhl(金币+3): 2010-08-09 10:29:09
三点接种法：
要获得霉菌的单菌落，宜在平板上用三点接种法接种。即用接种针沾取少量霉菌孢子，在琼脂平板上点成等边三角形的三点。经培养后，每皿形成三个菌落。其优点不但在一个培养皿上同种菌落有三个重复，更重要的是在菌落彼此相接近的边缘，常留有一条狭的空白地带，此处菌丝生长稀疏，较透明，还分化出稀落的典型子实器，因此可以直接把培养皿放在低倍镜下观察，便于根据形态特点进行菌种的鉴定。这是单点接种法所难以做到的。
三点接种：用接种针从菌种斜面上分别挑取少量菌种孢子，
点接到对应的平板上。操作要点为：
① 标明三点位置：欲使点接的三点分布均匀，可用记号笔先在平板底部以等边三角形状 标上三点。
② 取接种针：拿接种针，先在火焰上烧红灭菌，并在平板培养基的边缘冷却且蘸湿。
③ 沾取孢子：将灭过菌并蘸湿的接种针伸入菌种管,用针尖沾取少量霉菌孢子。
④ 点接：以垂直法或水平法把接种针上沾着的孢子以垂直的方向轻轻
的点接到平板培养基表面预先做好标记的部位。注意在点接时切勿刺破培养基。
培养：将点接好的平板倒置于28℃恒温箱中培养。48小时后开始观察生长情况。
恒温箱中培养霉菌25～28℃
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
4楼2010-08-09 08:17:19
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fengtao7905

木虫 (正式写手)
我要多多学习！~
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WHZYS
5楼2010-08-09 08:38:13
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lllk2008

木虫 (小有名气)
njxmhl(金币+1): 2010-08-09 10:29:35
霉菌确实很难获得单菌落，我们当时操作的时候是用接种环轻微接触后沾了下平板，因为孢子的分散性，需要操作。
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6楼2010-08-09 09:32:12
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njxmhl

木虫 (小有名气)

加入山梨醇，可获得单菌落

如题
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7楼2011-03-21 10:16:42
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
我记得有专门的培养基可以让真菌不那么容易扩散
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8楼2011-03-21 10:24:02
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flightty

木虫 (正式写手)
培养霉菌时，如果你用的是营养比较单一的培养基如PDA，分离培养时需要加入适量的脱氧胆酸钠抑制菌落大小。如果是采用营养丰富的平板分离培养基，菌丝由于营养比较丰富，不会向外快速扩散，菌落不会太大。
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9楼2011-03-21 15:33:21
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