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njxmhl

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何获得单菌落 已有5人参与

本人在做黑曲霉和木霉平板酶活水解圈时,发现黑曲霉和木霉在平板上长成一片,不是单菌落,特向各位请教,如何才能黑曲霉和木霉在平板上长成单菌落?
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flightty

木虫 (正式写手)

培养霉菌时,如果你用的是营养比较单一的培养基如PDA,分离培养时需要加入适量的脱氧胆酸钠抑制菌落大小。如果是采用营养丰富的平板分离培养基,菌丝由于营养比较丰富,不会向外快速扩散,菌落不会太大。
9楼2011-03-21 15:33:21
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yrq287

金虫 (正式写手)

划线了吗?要不不通浓度稀释涂布?
牛年有吉利
3楼2010-08-09 08:04:32
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烟大考研

金虫 (正式写手)

可以采用三点接种法

★ ★ ★
看天(金币+3):鼓励 2010-08-09 08:32:35
njxmhl(金币+3): 2010-08-09 10:29:09
三点接种法:
要获得霉菌的单菌落,宜在平板上用三点接种法接种。即用接种针沾取少量霉菌孢子,在琼脂平板上点成等边三角形的三点。经培养后,每皿形成三个菌落。其优点不但在一个培养皿上同种菌落有三个重复,更重要的是在菌落彼此相接近的边缘,常留有一条狭的空白地带,此处菌丝生长稀疏,较透明,还分化出稀落的典型子实器,因此可以直接把培养皿放在低倍镜下观察,便于根据形态特点进行菌种的鉴定。这是单点接种法所难以做到的。
三点接种:用接种针从菌种斜面上分别挑取少量菌种孢子,
点接到对应的平板上。操作要点为:
① 标明三点位置:欲使点接的三点分布均匀,可用记号笔先在平板底部以等边三角形状 标上三点。
② 取接种针:拿接种针,先在火焰上烧红灭菌,并在平板培养基的边缘冷却且蘸湿。
③ 沾取孢子:将灭过菌并蘸湿的接种针伸入菌种管,用针尖沾取少量霉菌孢子。
④ 点接:以垂直法或水平法把接种针上沾着的孢子以垂直的方向轻轻
的点接到平板培养基表面预先做好标记的部位。注意在点接时切勿刺破培养基。
培养:将点接好的平板倒置于28℃恒温箱中培养。48小时后开始观察生长情况。
恒温箱中培养霉菌25~28℃
心信其可行,则移山填海之难,终有成功之日;心信其不可行,则反掌折枝之易,亦无收效之期
4楼2010-08-09 08:17:19
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lllk2008

木虫 (小有名气)

njxmhl(金币+1): 2010-08-09 10:29:35
霉菌确实很难获得单菌落,我们当时操作的时候是用接种环轻微接触后沾了下平板,因为孢子的分散性,需要操作。
6楼2010-08-09 09:32:12
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