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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

[求助] 分离纯化一种酶,需要知道关于这种酶的哪些信息?一般如何操作?

如题
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研究僧
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-18 20:41:16
这个可以说很简单也可以说很复杂,不知道怎么说了,文献是一定要读的,酶活力和蛋白质是要会测的,其它电泳技术之类的也要会,太泛了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-18 19:03:32
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~明晓溪~

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先应该知道它的分子量,等电点等,如果可以,N末端的序列测出来,这样就可以进行序列比对!
3楼2011-07-18 21:17:07
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冬虫夏草1

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3, EPI+1): 感谢交流,继续加油^_^ 2011-07-18 22:56:23
分子量,大概的构象,等电点,溶解度等
分离纯化方法根据你的表达方式而定:
例如你用原核表达系统并选择了带(His)6标签或GST标签等就简单了,直接根据其特性就能纯化,但有无活性另看了。
若无特殊标签,就我那个常规方法:捣碎细胞—离心—盐析—层析(疏水层析、离子交换、凝胶过滤等)—透析—电泳检测效果等步骤。
倚楼听风雨,淡看江湖路!
4楼2011-07-18 22:29:03
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jackie_jang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

alqfren(金币+5): 2011-07-24 21:35:05
我现在在做呢!好麻烦啊~必须看文献,特别是英文的。怎么也要做分离纯化,酶学性质研究,分子量测定。
流动的水没有形状,漂流的风找不到踪迹。
5楼2011-07-19 09:55:52
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547star

木虫 (著名写手)

至少要知道酶活的测定.
为什么
6楼2011-12-05 10:40:12
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冬虫夏草1 at 2011-07-18 22:29:03:
分子量,大概的构象,等电点,溶解度等
分离纯化方法根据你的表达方式而定:
例如你用原核表达系统并选择了带(His)6标签或GST标签等就简单了,直接根据其特性就能纯化,但有无活性另看了。
若无特殊标签,就 ...

酶的话,活性最重要。样品处理不好的话,经常会活性丢失。
7楼2011-12-05 15:58:35
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