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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 分离纯化一种酶，需要知道关于这种酶的哪些信息？一般如何操作？
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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

[求助] 分离纯化一种酶，需要知道关于这种酶的哪些信息？一般如何操作？

如题
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研究僧
1楼 2011-07-18 16:41:00
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-18 20:41:16
这个可以说很简单也可以说很复杂，不知道怎么说了，文献是一定要读的，酶活力和蛋白质是要会测的，其它电泳技术之类的也要会，太泛了。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-18 19:03:32
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~明晓溪~

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先应该知道它的分子量，等电点等，如果可以，N末端的序列测出来，这样就可以进行序列比对！
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3楼2011-07-18 21:17:07
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冬虫夏草1

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3, EPI+1): 感谢交流，继续加油^_^ 2011-07-18 22:56:23
分子量，大概的构象，等电点，溶解度等
分离纯化方法根据你的表达方式而定：
例如你用原核表达系统并选择了带（His）6标签或GST标签等就简单了，直接根据其特性就能纯化，但有无活性另看了。
若无特殊标签，就我那个常规方法：捣碎细胞—离心—盐析—层析（疏水层析、离子交换、凝胶过滤等）—透析—电泳检测效果等步骤。
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倚楼听风雨，淡看江湖路！
4楼2011-07-18 22:29:03
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jackie_jang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

alqfren(金币+5): 2011-07-24 21:35:05
我现在在做呢！好麻烦啊~必须看文献，特别是英文的。怎么也要做分离纯化，酶学性质研究，分子量测定。
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流动的水没有形状，漂流的风找不到踪迹。
5楼2011-07-19 09:55:52
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547star

木虫 (著名写手)
至少要知道酶活的测定.
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为什么
6楼2011-12-05 10:40:12
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冬虫夏草1 at 2011-07-18 22:29:03:
分子量，大概的构象，等电点，溶解度等
分离纯化方法根据你的表达方式而定：
例如你用原核表达系统并选择了带（His）6标签或GST标签等就简单了，直接根据其特性就能纯化，但有无活性另看了。
若无特殊标签，就 ...

酶的话，活性最重要。样品处理不好的话，经常会活性丢失。
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7楼2011-12-05 15:58:35
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