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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 连接转化问题
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guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

[求助] 连接转化问题

将基因和真核表达载体连接，然后转化DH5α，涂含合适抗生素的培养皿，第二天蓝白斑筛，挑取单菌落接种到LB中摇菌过夜，可是LB中忘记加抗生素了，结果会怎样呢
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1楼 2013-04-24 11:08:05
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lcgag777

禁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励新虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-24 19:23:57
本帖内容被屏蔽
2楼2013-04-24 11:19:57
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chunhua0312

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 19:23:43
这就要看：你个人接种时无菌操作的严格程度了。
重新摇菌也不麻烦。
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绿露
3楼2013-04-24 12:04:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 19:23:30
质粒的复制不与染色体同步，没有抗生素压力下，细菌在繁殖过程中会逐渐丢失质粒。你应该重新摇菌。
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4楼2013-04-24 12:55:24
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senix

木虫 (小有名气)
重新做吧！
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做实验就是和上帝玩游戏！
5楼2013-04-24 17:15:07
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sunguangchao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
guaiyaya(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-04-28 22:58:26
转化时，转入质粒有抗抗生素基因标记，如果LB 培养基中不加抗生素，，第一造成杂菌的生长，另外，及时长出菌落你也不能确定哪个是你要筛选的成功转入T-DNA的菌株，建议重新摇菌
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仍然自由自我，永远高唱我歌，走遍千里
6楼2013-04-28 21:21:47
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
guaiyaya(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-21 08:31:37
重新摇菌吧。如果挑的单菌落不好，加上没加抗生素，在摇菌时很容易培养不出转化子{在培养时质粒也容易排出菌体外}
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要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
7楼2013-05-16 11:06:24
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