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guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

[求助] 连接转化问题

将基因和真核表达载体连接,然后转化DH5α,涂含合适抗生素的培养皿,第二天蓝白斑筛,挑取单菌落接种到LB中摇菌过夜,可是LB中忘记加抗生素了,结果会怎样呢
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lcgag777

禁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励新虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-24 19:23:57
本帖内容被屏蔽

2楼2013-04-24 11:19:57
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chunhua0312

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 19:23:43
这就要看:你个人接种时无菌操作的严格程度了。
重新摇菌也不麻烦。
绿露
3楼2013-04-24 12:04:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 19:23:30
质粒的复制不与染色体同步,没有抗生素压力下,细菌在繁殖过程中会逐渐丢失质粒。你应该重新摇菌。
4楼2013-04-24 12:55:24
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senix

木虫 (小有名气)

重新做吧!
做实验就是和上帝玩游戏!
5楼2013-04-24 17:15:07
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sunguangchao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
guaiyaya(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-28 22:58:26
转化时,转入质粒有抗抗生素基因标记,如果LB 培养基中不加抗生素,,第一造成杂菌的生长,另外,及时长出菌落你也不能确定哪个是你要筛选的成功转入T-DNA的菌株,建议重新摇菌
仍然自由自我,永远高唱我歌,走遍千里
6楼2013-04-28 21:21:47
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


guaiyaya(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-21 08:31:37
重新摇菌吧。如果挑的单菌落不好,加上没加抗生素,在摇菌时很容易培养不出转化子{在培养时质粒也容易排出菌体外}
要么读书,要么旅行,身体和灵魂,必须有一个在路上
7楼2013-05-16 11:06:24
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