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hraikeyan

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[求助] 基因文库中，连接转化问题

大家好：我最近在做基因文库的连接转化。但是发现一个问题，希望大家能帮帮忙，解释一下。
连接时我做了三组：1、未去磷酸化载体，T4酶，buffer。
                              2、去磷酸化载体+DNA不完全酶切片段（Sau3A）,buffer,T4酶。
                              3、去磷酸化载体，T4酶，buffer
结果是：1、密密麻麻长了一板子，全是蓝斑
            2、很稀疏长了一板，少部分蓝斑。
            3、也长了一板，但是比2中的多，蓝斑较多。
我认为在这个对比试验中，3上的板子应该不长，或者长的很少很少。因为是去磷酸化的空载体，如果不发生自连，应该吧、会不长。但是居然比2中的长的还多。
还有一个问题，上学期我也做了一次文库的转化，去磷酸化载体+DNA不完全酶切片段转化后，长的菌很多，但是这学期做的明显菌长的很少。（DNA片段用的是上学期12月份酶切的.会不会有影响）

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nothing isimpossible

1楼 2013-04-04 11:14:00

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snoopyzxx

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