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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 连接有问题
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索索00

铁虫 (小有名气)

[求助] 连接有问题

各位  我的连接体系做好了可以放冰箱吗？还是立即做转化呢？在线等。。。。
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1楼 2011-12-10 11:34:48
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回帖置顶 ( 共有1个 )

索索00

铁虫 (小有名气)
恩 ，谢谢各位，我的问题又出来了，我转化后，培养12个小时，质粒长的有300多吧，说明感受态还是可以的，但是我的连接产物最多20几个，是什么情况呀，是连接的问题？还是其他的。在线等。谢啦!
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9楼2011-12-17 07:49:31
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普通回帖

gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流。不过楼主的貌似是连接做完之后的保存问题…… 2011-12-11 18:16:43
看你的连接酶，有的公司的连接酶可以做快速连接（室温连接5min）就可以转化，有些连接酶需要16度连接过夜，有些可以16度连接4小时等等，为了保准起见我建议你冰箱4度连接过夜，然后明天做转化！
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大家共同交流、共同提高！！！
2楼2011-12-10 20:15:13
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西瓜(金币+1): 鼓励交流！ 2011-12-11 18:17:05
连接体系做好了是指连接完成了？连接后要马上转化哦
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2011-12-10 20:19:50
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励新虫交流 2011-12-11 18:17:36
本帖内容被屏蔽
4楼2011-12-10 22:26:11
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 同意！ 2011-12-11 18:17:45
连接时间的长短不是克隆成败的关键因素，所以直接转化或放4度过夜都没问题。
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5楼2011-12-10 23:03:48
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cloverplm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
4℃过夜连效果不错，赶时间的话，也可以16℃连接个半小时也可以，片段长点的稍微连接时间长点，连接完成后就早点做转化吧，放太久也不好\(^o^)/~
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净——静——竞——进
6楼2011-12-13 21:34:43
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baby0032

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-14 19:42:59
如果是来不及做转化，可以在你相应的连接温度下延长时间，一般没什么问题的。我们实验室以前经常还有人连接24h左右
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7楼2011-12-14 09:17:16
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wccc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励 2011-12-14 19:43:10
放4度，连接酶仍旧有活性的，第二天转一点问题没有
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8楼2011-12-14 15:23:16
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by 索索00 at 2011-12-17 07:49:31:
恩 ，谢谢各位，我的问题又出来了，我转化后，培养12个小时，质粒长的有300多吧，说明感受态还是可以的，但是我的连接产物最多20几个，是什么情况呀，是连接的问题？还是其他的。在线等。谢啦!

只要有你要的克隆就行，管它长了几个呢。
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10楼2011-12-17 10:50:07
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