应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于转化的问题？
231/3返回列表123下一页
查看: 3069  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王玉民

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于转化的问题？

请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
心晴
1楼 2011-10-20 09:58:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很多人一般会选择90S，复苏的话选择37℃，不超过200rpm，作个参考
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-20 10:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 热心哦 2011-10-20 18:27:33
复苏的时间在60min左右
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-20 10:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王玉民

新虫 (小有名气)
西瓜: 买的是公司的感受态的话，以说明书为准吧，这个是最权威的了。转化的其他过程可能有问题，不妨详细描述下以利于大家分析。 2011-10-20 18:26:47
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。
赞一下(1人) 回复此楼
心晴
4楼2011-10-20 10:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助回帖 2011-10-24 10:23:39
热激时间50s到90s的时间都用过，不过我做过很多次热激，大都是60s左右即可。复苏的时间一般是150rpm，1hr左右
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-10-20 10:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

说明书上提供的也仅作个参考，最好是问问自己的老师或是师兄姐，选择最优的条件，毕竟很多仪器试剂条件什么的还是有点差别
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-20 10:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-24 10:24:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王玉民 at 2011-10-20 10:27:29:
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。

我还没有用过你说的那个，一般用TaKaRa与promega的，也看过别的，就是没有印象你说的那2个数字啊。你们实验室有别人跟你用同样的感受态做热激吗？热激的温度是42度，用水浴
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-10-20 10:37:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-20 10:37:17:
我还没有用过你说的那个，一般用TaKaRa与promega的，也看过别的，就是没有印象你说的那2个数字啊。你们实验室有别人跟你用同样的感受态做热激吗？热激的温度是42度，用水浴

热击不一定用水浴的，其实干热更好
赞一下 回复此楼
8楼2011-10-20 10:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得吧，那个感受态也有关系，请问你们这个感受态是自己做的（做好保存了多久），还是生物公司买的？
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-20 10:43:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 剪切力的问题第一次听说，有没有来源呀，学习下.不过不涂板的话不容易得到单菌落吧。 2011-10-20 18:29:09
转化 冰上融化感受态 加入DNA后用枪混匀后置冰上 30min 其间勿动  42度热激90s 冰上放置2min冷却 加入1ml LB培养基37度恢复1h 涂布平板 恢复时转速随意调当然切勿过高 不转也行  板子张的不好不一定全是转化的原因 可能因为涂布板子时出的问题 建议直接将恢复后的菌液倒在平板上超净台吹干后倒置培养 这样就避免了涂布时的剪切力对菌照成的损伤
赞一下(1人) 回复此楼
冷风过心变热
10楼2011-10-20 10:47:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王玉民 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 68gx6bh3ei 2026-07-09 3/150 2026-07-10 06:33 by pbuc7it0i8
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ph7bxbho8f 2026-07-09 3/150 2026-07-10 05:53 by j4frgf6zcw
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 al9t2f50x3 2026-07-09 4/200 2026-07-10 05:33 by j4frgf6zcw
[考研] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 al9t2f50x3 2026-07-09 4/200 2026-07-10 05:33 by j4frgf6zcw
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[基金申请] 信息学部会评时间 +3 xuel2011 2026-07-06 3/150 2026-07-09 19:05 by mollyzhang_2003
[基金申请] 祈祷青基必中 50+3 hadengry 2026-07-09 9/450 2026-07-09 17:37 by 文杰猪猪
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +3 S778950906 2026-07-08 5/250 2026-07-09 15:46 by S778950906
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +11 且听虎啸 2026-07-09 14/700 2026-07-09 15:27 by libeny
[有机交流] 硝基还原 20+3 暮年飞雪 2026-07-07 5/250 2026-07-09 13:30 by tfang
[基金申请] 化学口会评？应用基础研究和基础研究，希望能分开 +3 Tide man 2026-07-08 3/150 2026-07-09 11:36 by dede5556
[基金申请] 今年E04面上 +15 布布和一二 2026-07-05 21/1050 2026-07-09 10:25 by 学员fOzRO9
[硕博家园] 大龄残疾硕士的一点执念 +14 3776737374 2026-07-06 22/1100 2026-07-09 06:07 by lovechizi
[基金申请] 生命口会评 +4 wuke100666 2026-07-07 4/200 2026-07-08 16:38 by 逍遥不够自在
[教师之家] 网络举报学术不端成为了男女之间情杀的手段了，真荒唐。。。 +3 zju2000 2026-07-04 3/150 2026-07-07 21:00 by hyx552200
[有机交流] Suzuki偶联中硼酸酯原料掉下的硼酸酯是否可以自身偶联，生成B2Pin2杂质 500+3 天下大同 2026-07-06 3/150 2026-07-07 10:31 by martyr_oyx
[论文投稿] 刑法学论文投稿求助 +3 高源678 2026-07-04 5/250 2026-07-06 12:20 by 平天尺
[论文投稿] Journal of Environmental Chemical Engineering +3 雪花天涯 2026-07-05 3/150 2026-07-06 09:00 by bobvan
[基金申请] 最后一年，祈求好运 +3 pyw1992 2026-07-06 3/150 2026-07-06 08:53 by 苏_frp
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭