应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于转化的问题？
231/3返回列表123下一页
查看: 3262  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王玉民

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于转化的问题？

请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
心晴
1楼 2011-10-20 09:58:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很多人一般会选择90S，复苏的话选择37℃，不超过200rpm，作个参考
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-20 10:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 热心哦 2011-10-20 18:27:33
复苏的时间在60min左右
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-20 10:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王玉民

新虫 (小有名气)
西瓜: 买的是公司的感受态的话，以说明书为准吧，这个是最权威的了。转化的其他过程可能有问题，不妨详细描述下以利于大家分析。 2011-10-20 18:26:47
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。
赞一下(1人) 回复此楼
心晴
4楼2011-10-20 10:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助回帖 2011-10-24 10:23:39
热激时间50s到90s的时间都用过，不过我做过很多次热激，大都是60s左右即可。复苏的时间一般是150rpm，1hr左右
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-10-20 10:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

说明书上提供的也仅作个参考，最好是问问自己的老师或是师兄姐，选择最优的条件，毕竟很多仪器试剂条件什么的还是有点差别
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-20 10:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peace12039088

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-24 10:24:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王玉民 at 2011-10-20 10:27:29:
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。

我还没有用过你说的那个，一般用TaKaRa与promega的，也看过别的，就是没有印象你说的那2个数字啊。你们实验室有别人跟你用同样的感受态做热激吗？热激的温度是42度，用水浴
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-10-20 10:37:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-20 10:37:17:
我还没有用过你说的那个，一般用TaKaRa与promega的，也看过别的，就是没有印象你说的那2个数字啊。你们实验室有别人跟你用同样的感受态做热激吗？热激的温度是42度，用水浴

热击不一定用水浴的，其实干热更好
赞一下 回复此楼
8楼2011-10-20 10:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得吧，那个感受态也有关系，请问你们这个感受态是自己做的（做好保存了多久），还是生物公司买的？
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-20 10:43:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 剪切力的问题第一次听说，有没有来源呀，学习下.不过不涂板的话不容易得到单菌落吧。 2011-10-20 18:29:09
转化 冰上融化感受态 加入DNA后用枪混匀后置冰上 30min 其间勿动  42度热激90s 冰上放置2min冷却 加入1ml LB培养基37度恢复1h 涂布平板 恢复时转速随意调当然切勿过高 不转也行  板子张的不好不一定全是转化的原因 可能因为涂布板子时出的问题 建议直接将恢复后的菌液倒在平板上超净台吹干后倒置培养 这样就避免了涂布时的剪切力对菌照成的损伤
赞一下(1人) 回复此楼
冷风过心变热
10楼2011-10-20 10:47:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王玉民 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 10:26 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 5/250 2026-09-29 09:52 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 09:24 by JzYBbHIXWSrW
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 09:18 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:34 by ZvyPK8n6Nfki
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:18 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:28 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +7 zju2000 2026-09-26 8/400 2026-09-28 16:42 by beefly
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭