24小时热门版块排行榜    

查看: 4053  |  回复: 19

jzyzqbx

木虫 (小有名气)

[求助] 求助一个关于酿酒酵母转化的问题

最近在做DNA改组,想利用酿酒酵母作为表达载体,因为改组后的DNA需要筛选,需要建库,请问载体与目的基因连接后可以直接转化到酿酒酵母中进行筛选吗?如果可以,载体与目的基因加入连接酶连接过夜后,在转入酵母前需要做怎样的处理。怎样可以提高转化效率,用电转还是化转呢?
谢谢大家
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

重组的景区

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by jzyzqbx at 2012-02-16 10:18:32:
酿酒酵母的电转怎么做呀?

载体构建的步骤和大肠杆菌中质粒转化一样的,也是转大肠,等构建成功后提质粒电转化酵母,文献很多的,自己查查看就知道了。
6楼2012-02-16 13:20:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
16楼2012-02-20 15:35:18
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
普通回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电转比化转效率高这是肯定的。
2楼2012-02-16 07:54:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般酿酒酵母的表达载体都是穿梭载体,建库那一步为什么不在大肠杆菌里面做呢?肯定更容易操作一些。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-02-16 09:17:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-02-16 07:54:08:
电转比化转效率高这是肯定的。

酿酒酵母的电转怎么做呀?
4楼2012-02-16 10:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by susizheng at 2012-02-16 09:17:49:
一般酿酒酵母的表达载体都是穿梭载体,建库那一步为什么不在大肠杆菌里面做呢?肯定更容易操作一些。

先转大肠,再转酵母的话会不会工作量比较大呢?而且基因来源于真核,在大肠中不能表达。看过一篇文献是酵母建库的,不知可行否
5楼2012-02-16 10:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?
自己选择的路,跪着也要走完!
7楼2012-02-16 15:54:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
8楼2012-02-16 17:19:28
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
9楼2012-02-16 17:25:33
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lmxu0917 at 2012-02-16 17:19:28:
你用的是PYD1载体?

是的,你也是么?
自己选择的路,跪着也要走完!
10楼2012-02-16 20:23:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jzyzqbx 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 211本,11408一志愿中科院277分,曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010,总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见