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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

[求助] 求助一个关于酿酒酵母转化的问题

最近在做DNA改组,想利用酿酒酵母作为表达载体,因为改组后的DNA需要筛选,需要建库,请问载体与目的基因连接后可以直接转化到酿酒酵母中进行筛选吗?如果可以,载体与目的基因加入连接酶连接过夜后,在转入酵母前需要做怎样的处理。怎样可以提高转化效率,用电转还是化转呢?
谢谢大家
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?
自己选择的路,跪着也要走完!
7楼2012-02-16 15:54:45
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lmxu0917 at 2012-02-16 17:19:28:
你用的是PYD1载体?

是的,你也是么?
自己选择的路,跪着也要走完!
10楼2012-02-16 20:23:28
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by wanggl2004 at 2012-02-16 22:36:19:
EBY100的转化不难呀!

我做了很久都没有做出来,用MD+leu+trp的培养基划线EBY100,居然不长,然而在YPD上却长出来了,我怀疑是不是我的EBY100有问题,楼主有没有EBY100这个菌种啊?
自己选择的路,跪着也要走完!
17楼2012-03-07 19:58:12
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