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157382

银虫 (小有名气)

[求助] 请问大肠杆菌和酿酒酵母(或必赤酵母)进行蛋白质表达哪个成本高?

有个问题一直很困惑,现在想对一种微生物酶进行改造,如果从生产和将来的应用成本角度来说, 在大肠杆菌中表达(质粒表达,IPTG诱导)和在真核生物(酿酒酵母和必赤酵母)中表达,如果表达量一样的话, 哪种生产成本更高, 哪种更划算?
    请高手不吝赐教,谢谢!!!
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hblaowei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

157382(金币+6): 非常感谢!!! 2011-11-27 09:30:22
你要先看看你的酶在原核表达下的活性,如果活性高,肯定首选原核表达,如果你的酶结构比较复杂,原核表达后的结构乱了,或者全市包含体什么的,你要进行很复杂的后续处理,那样就不划算了,建议用真核表达,但是真核表达的量肯定比不上原核表的,它的优点就是蛋白的高级结构可能完整些,也就是你的酶活力可能高些。表达酶关键不在量上,在酶活力上吧
为了儿时的梦想,正在匍匐前进!
4楼2011-11-26 22:51:25
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强蓝色经典

铜虫 (初入文坛)


我们这边正好是做酵母和大肠杆菌表达的,积累了比较丰富的经验,表达成本的话,肯定是酵母的要贵了,我的QQ:2449681958
5楼2011-11-27 10:28:00
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普通回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

157382(金币+2): 非常感谢 2011-11-27 09:29:53
酵母吧    怎么说也是真核的啊
2楼2011-11-26 20:49:24
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

157382(金币+2): 非常感谢 2011-11-27 09:30:08
问题是这两者的表达量能一样吗?
很少见到酵母的表达量能达到大肠杆菌那种程度的。
酶的话,如果活性在两种表达系统中差异不大,我建议还是细菌吧。
生物资源交流QQ群:1044518333
3楼2011-11-26 22:18:10
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hblaowei

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
谢谢楼主的奖励,建议你的慷慨,送花一朵给你
为了儿时的梦想,正在匍匐前进!
6楼2011-11-27 13:30:02
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

在宿主的选择上,肯定要根据你的基因来源来选择,原因楼上几位说的很清楚了。但在操作上原核肯定要容易很多,而真核表达在分泌这方面具有优势,也就是后续的酶分离成本上有优势。
就表达量来看大肠杆菌的T7和比赤酵母的pOAX都是比较强的启动子,表达量上一般会鱿鱼酿酒酵母的组成型启动子的表达。
Thank-you,so-blue.
7楼2011-11-27 14:04:12
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

我觉得要是大肠杆菌能表达出来肯定首选大肠了,酵母都是迫不得已才用的。就成本来说,酵母花费的不光是培养基,更重要的是花费时间很长,产量也不高,更麻烦的是蛋白不好纯化出来。要和大肠产量相比,等到相同的纯蛋白,酵母的代价起码是10倍以上
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
8楼2011-11-27 23:10:42
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
9楼2011-11-28 09:33:29
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航航宝贝

银虫 (正式写手)

大肠杆菌能表达出来肯定首选大肠了,酵母都是迫不得已才用的。就成本来说,酵母花费的不光是培养基,更重要的是花费时间很长,产量也不高,更麻烦的是蛋白不好纯化出来.记得我有个师妹以前做的毕赤酵母表达,做了很长时间才做出来,呵呵,花钱花的老板很是心疼,就怕她做不好
加油,博友们
10楼2011-11-28 10:13:52
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