24小时热门版块排行榜    

查看: 3331  |  回复: 19
【悬赏金币】回答本帖问题,作者jzyzqbx将赠送您 5 个金币

jzyzqbx

木虫 (小有名气)

[求助] 求助一个关于酿酒酵母转化的问题

最近在做DNA改组,想利用酿酒酵母作为表达载体,因为改组后的DNA需要筛选,需要建库,请问载体与目的基因连接后可以直接转化到酿酒酵母中进行筛选吗?如果可以,载体与目的基因加入连接酶连接过夜后,在转入酵母前需要做怎样的处理。怎样可以提高转化效率,用电转还是化转呢?
谢谢大家
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

重组的景区

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by jzyzqbx at 2012-02-16 10:18:32:
酿酒酵母的电转怎么做呀?

载体构建的步骤和大肠杆菌中质粒转化一样的,也是转大肠,等构建成功后提质粒电转化酵母,文献很多的,自己查查看就知道了。
6楼2012-02-16 13:20:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
16楼2012-02-20 15:35:18
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
普通回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电转比化转效率高这是肯定的。
2楼2012-02-16 07:54:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般酿酒酵母的表达载体都是穿梭载体,建库那一步为什么不在大肠杆菌里面做呢?肯定更容易操作一些。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-02-16 09:17:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-02-16 07:54:08:
电转比化转效率高这是肯定的。

酿酒酵母的电转怎么做呀?
4楼2012-02-16 10:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by susizheng at 2012-02-16 09:17:49:
一般酿酒酵母的表达载体都是穿梭载体,建库那一步为什么不在大肠杆菌里面做呢?肯定更容易操作一些。

先转大肠,再转酵母的话会不会工作量比较大呢?而且基因来源于真核,在大肠中不能表达。看过一篇文献是酵母建库的,不知可行否
5楼2012-02-16 10:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?
自己选择的路,跪着也要走完!
7楼2012-02-16 15:54:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
8楼2012-02-16 17:19:28
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
9楼2012-02-16 17:25:33
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lmxu0917 at 2012-02-16 17:19:28:
你用的是PYD1载体?

是的,你也是么?
自己选择的路,跪着也要走完!
10楼2012-02-16 20:23:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jzyzqbx 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] reject后小感 +5 sioc-sunj 2024-11-14 7/350 2024-11-14 18:09 by m_zyj
[精细化工] 同一个反应相同的反应条件,是不是反应结果相差不大? +4 青霉素 2024-11-11 4/200 2024-11-14 17:33 by zinedine
[教师之家] 大学老师 +8 考研一路顺风 2024-11-13 10/500 2024-11-14 16:57 by xli1984
[教师之家] 这种人痛苦吗 +11 2671 2024-11-12 12/600 2024-11-14 16:50 by syl200707
[基金申请] 博后基金分组排名 +6 攻城2025 2024-11-14 6/300 2024-11-14 16:31 by wjykycg
[基金申请] 博后资助名单出来了 +10 Shxjjxjkx 2024-11-14 12/600 2024-11-14 16:07 by Vincent1900
[有机交流] 同一个反应回流情况不同 20+3 1853846 2024-11-12 3/150 2024-11-14 15:42 by 太阳谷
[教师之家] 处在人生职业的分水岭 +4 otani 2024-11-13 4/200 2024-11-14 14:17 by mddzwo
[考博] 随缘读博 一篇中科院一区Top 一篇中科院二区Top 两篇专利 +5 Ricoch4t 2024-11-13 11/550 2024-11-14 10:54 by Ricoch4t
[硕博家园] 实验进度 +8 麻辣烫。 2024-11-11 13/650 2024-11-13 23:25 by 麻辣烫。
[论文投稿] 找不到审稿人 +4 吉祥如意141913 2024-11-13 4/200 2024-11-13 16:33 by 13333105938
[论文投稿] 投稿系统中的通讯作者和文章中的通讯作者不一样,文章目前被录用了? +3 babybabygo 2024-11-12 4/200 2024-11-13 12:40 by babybabygo
[硕博家园] 如何看清华北大硕博的毕业论文 +6 2025lucky 2024-11-10 6/300 2024-11-12 22:46 by 楚扬长流
[论文投稿] 论文接受后,编辑部发邮件提醒缺少附件 15+4 上善若水明泪 2024-11-10 4/200 2024-11-12 14:24 by 北京莱茵润色
[有机交流] 求助NMR +5 苯巴比妥! 2024-11-09 5/250 2024-11-12 11:20 by 88817753
[基金申请] 请问:工作单位缺乏条件,青年基金申报书可以写读博学校的实验平台吗? +5 dxmx 2024-11-08 7/350 2024-11-11 23:08 by dxcharlary
[基金申请] 四川基金项目状态 +3 doctor廴 2024-11-08 7/350 2024-11-11 11:34 by 20094958
[考博] 985硕 电池方向考博 +3 物化w7wx 2024-11-08 5/250 2024-11-11 09:38 by 物化w7wx
[论文投稿] renewable energy 添加作者 15+3 Hebauwww12 2024-11-09 4/200 2024-11-11 08:42 by 北京莱茵润色
[考博] 中南大学的博士好申请吗 +3 娜娜不是娜 2024-11-07 4/200 2024-11-08 18:54 by tomboliboo
信息提示
请填处理意见