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wanggl2004

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45:
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?

EBY100的转化不难呀!
思考是行动的种子!
11楼2012-02-16 22:36:19
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wanggl2004

木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 20:23:28:
是的,你也是么?

pYD1和EBY100的展示系统很成熟呀,很好做的哦
思考是行动的种子!
12楼2012-02-16 22:39:19
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by lmxu0917 at 2012-02-16 17:25:33:
酵母转化效率低,用酵母转化建库的库容量会很小的。一般都是用大肠杆菌建好库后再转质粒进酵母细胞。
我没转过连接产物进酵母细胞。
酵母细胞的电转化有的需要将载体进行线性化。我当时转的质粒是附加型质粒,不 ...

我的基因不能在大肠中正常表达,所以只能酵母建库了,本来想用以前做的那个酵母,载体也是附加型质粒,不过因为表达蛋白需要半乳糖诱导,所以老师打算让我换一种酵母做,化转具体怎么做呢?
13楼2012-02-18 00:32:43
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45:
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?

现在还没开始转,还在讨论可行性,打算换一种酵母转个试试,为什么要用酵母表面展示呀?是因为蛋白不能正常分泌到胞外吗?
14楼2012-02-18 00:35:44
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

自己看看吧,不解释~~~

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15楼2012-02-18 10:59:15
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
16楼2012-02-20 15:35:18
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by wanggl2004 at 2012-02-16 22:36:19:
EBY100的转化不难呀!

我做了很久都没有做出来,用MD+leu+trp的培养基划线EBY100,居然不长,然而在YPD上却长出来了,我怀疑是不是我的EBY100有问题,楼主有没有EBY100这个菌种啊?
自己选择的路,跪着也要走完!
17楼2012-03-07 19:58:12
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xxbi

金虫 (初入文坛)

学习了!
18楼2012-06-05 20:36:53
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wanyun0123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 20:23:28
是的,你也是么?...

请问构建PYD1表达载体如何酶切,如何连接,如何转化?具体体系是怎么样的?急求,先谢过各位了!!!
19楼2014-11-18 19:19:45
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yuzaiyutian

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?

前辈你好,我们也想做EBY100。请问你否向您购买或者交换一下菌株呢?谢谢!
20楼2015-01-19 14:36:17
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