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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助一个关于酿酒酵母转化的问题
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wanggl2004

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45:
我也在做酿酒酵母，用的EBY100，一直在做化学转化，还没有成功呢，最后是要用酵母表面展示，请问楼主是不是也要做这个？

EBY100的转化不难呀！
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思考是行动的种子！
11楼2012-02-16 22:36:19
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wanggl2004

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 20:23:28:
是的，你也是么？

pYD1和EBY100的展示系统很成熟呀，很好做的哦
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思考是行动的种子！
12楼2012-02-16 22:39:19
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by lmxu0917 at 2012-02-16 17:25:33:
酵母转化效率低，用酵母转化建库的库容量会很小的。一般都是用大肠杆菌建好库后再转质粒进酵母细胞。
我没转过连接产物进酵母细胞。
酵母细胞的电转化有的需要将载体进行线性化。我当时转的质粒是附加型质粒，不 ...

我的基因不能在大肠中正常表达，所以只能酵母建库了，本来想用以前做的那个酵母，载体也是附加型质粒，不过因为表达蛋白需要半乳糖诱导，所以老师打算让我换一种酵母做，化转具体怎么做呢？
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13楼2012-02-18 00:32:43
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45:
我也在做酿酒酵母，用的EBY100，一直在做化学转化，还没有成功呢，最后是要用酵母表面展示，请问楼主是不是也要做这个？

现在还没开始转，还在讨论可行性，打算换一种酵母转个试试，为什么要用酵母表面展示呀？是因为蛋白不能正常分泌到胞外吗？
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14楼2012-02-18 00:35:44
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
自己看看吧，不解释~~~
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15楼2012-02-18 10:59:15
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
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16楼2012-02-20 15:35:18
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wanggl2004 at 2012-02-16 22:36:19:
EBY100的转化不难呀！

我做了很久都没有做出来，用MD+leu+trp的培养基划线EBY100，居然不长，然而在YPD上却长出来了，我怀疑是不是我的EBY100有问题，楼主有没有EBY100这个菌种啊？
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自己选择的路，跪着也要走完！
17楼2012-03-07 19:58:12
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xxbi

金虫 (初入文坛)
学习了！
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18楼2012-06-05 20:36:53
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wanyun0123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 20:23:28
是的，你也是么？...

请问构建PYD1表达载体如何酶切，如何连接，如何转化？具体体系是怎么样的？急求，先谢过各位了！！！
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19楼2014-11-18 19:19:45
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yuzaiyutian

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45
我也在做酿酒酵母，用的EBY100，一直在做化学转化，还没有成功呢，最后是要用酵母表面展示，请问楼主是不是也要做这个？

前辈你好，我们也想做EBY100。请问你否向您购买或者交换一下菌株呢？谢谢！
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20楼2015-01-19 14:36:17
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