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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

[求助] 求助一个关于酿酒酵母转化的问题

最近在做DNA改组,想利用酿酒酵母作为表达载体,因为改组后的DNA需要筛选,需要建库,请问载体与目的基因连接后可以直接转化到酿酒酵母中进行筛选吗?如果可以,载体与目的基因加入连接酶连接过夜后,在转入酵母前需要做怎样的处理。怎样可以提高转化效率,用电转还是化转呢?
谢谢大家
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 杜拉拉314159 at 2012-02-16 15:54:45:
我也在做酿酒酵母,用的EBY100,一直在做化学转化,还没有成功呢,最后是要用酵母表面展示,请问楼主是不是也要做这个?

现在还没开始转,还在讨论可行性,打算换一种酵母转个试试,为什么要用酵母表面展示呀?是因为蛋白不能正常分泌到胞外吗?
14楼2012-02-18 00:35:44
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电转比化转效率高这是肯定的。
2楼2012-02-16 07:54:08
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般酿酒酵母的表达载体都是穿梭载体,建库那一步为什么不在大肠杆菌里面做呢?肯定更容易操作一些。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-02-16 09:17:49
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-02-16 07:54:08:
电转比化转效率高这是肯定的。

酿酒酵母的电转怎么做呀?
4楼2012-02-16 10:18:32
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