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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于转化的问题？
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gagalady

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

42度 热击15s，
转速 170r  1h 就可以了
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11楼2011-10-20 10:55:01
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peace12039088

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 三目 at 2011-10-20 10:41:39:
热击不一定用水浴的，其实干热更好

说实话，做了无数次的热激，还没有尝试过干热，也没有人建议过，不过以后可以尝试，谢谢提醒。只是感觉水浴温度比干热要恒定些。你为什么说干热更好呢，做过对照试验？
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12楼2011-10-20 11:14:07
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三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-20 11:14:07:
说实话，做了无数次的热激，还没有尝试过干热，也没有人建议过，不过以后可以尝试，谢谢提醒。只是感觉水浴温度比干热要恒定些。你为什么说干热更好呢，做过对照试验？

我们实验室就是用干热的，干热受热更均匀，只是最近机器操作不当，进水烧坏了（干热是不能放水的），所以现在只能改水浴了
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13楼2011-10-20 11:26:28
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lz7233504

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

西瓜: 如果感受态本身带抗性的话可以不用复苏。如果转化的是质粒，复苏5分钟就够了。 2011-10-20 18:40:02
看你用什么感受态了 本人用的是Trans -I的热击30S足够，分子克隆书上说如果是氨苄抗性的话不用复苏直接涂板就行。
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14楼2011-10-20 14:12:45
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by 王玉民 at 2011-10-20 09:58:01:
请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？

转化是一个连续的过程 其中一步做不好就会影响转化效率；至于热激  我们以前统统42度 90s 转化效率基本上可以随心所欲了  前提是感受态不能太差；可以通过复苏时间 以及涂板的菌液量  以及复苏培养基的量 来控制转化效率
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15楼2011-10-21 09:05:31
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-20 11:14:07:
说实话，做了无数次的热激，还没有尝试过干热，也没有人建议过，不过以后可以尝试，谢谢提醒。只是感觉水浴温度比干热要恒定些。你为什么说干热更好呢，做过对照试验？

水浴和干热都用过，挺好的
这不是主要问题，只要结果好，那才是真的好
偶用42度45-50秒
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16楼2011-10-22 04:08:58
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 三目 at 2011-10-20 10:41:39:
热击不一定用水浴的，其实干热更好

空气传热速度更慢些，那时间怎么定呢？
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17楼2011-10-22 08:52:51
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peace12039088

银虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by xiaoweiwei121 at 2011-10-22 04:08:58:
水浴和干热都用过，挺好的
这不是主要问题，只要结果好，那才是真的好
偶用42度45-50秒

结果好，才是真的好！
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18楼2011-10-24 10:10:33
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wxq999

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

西瓜:编辑内容 2011-10-24 17:42
-------------广告内容-----------------
该虫多次发布广告，为了避免版主刷管理记录的嫌疑，不再每个帖子单独扣分，而是分几次重罚。请自重，勿扰乱论坛的正常交流！

[ Last edited by 西瓜 on 2011-10-24 at 17:42 ]
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19楼2011-10-24 16:58:35
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dears56

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
20楼2011-11-17 13:10:39
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