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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于转化的问题？
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王玉民

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于转化的问题？

请问大家，连接之后转化时，热击的时间使30s好还是90s好？复苏时摇床的转速和时间多少最合适？
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心晴
1楼 2011-10-20 09:58:01
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三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-20 11:14:07:
说实话，做了无数次的热激，还没有尝试过干热，也没有人建议过，不过以后可以尝试，谢谢提醒。只是感觉水浴温度比干热要恒定些。你为什么说干热更好呢，做过对照试验？

我们实验室就是用干热的，干热受热更均匀，只是最近机器操作不当，进水烧坏了（干热是不能放水的），所以现在只能改水浴了
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13楼2011-10-20 11:26:28
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很多人一般会选择90S，复苏的话选择37℃，不超过200rpm，作个参考
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2楼2011-10-20 10:23:20
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 热心哦 2011-10-20 18:27:33
复苏的时间在60min左右
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3楼2011-10-20 10:24:39
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王玉民

新虫 (小有名气)
西瓜: 买的是公司的感受态的话，以说明书为准吧，这个是最权威的了。转化的其他过程可能有问题，不妨详细描述下以利于大家分析。 2011-10-20 18:26:47
但是invitrogen的说明书上写的是30s转速是225rpm。我用这个方法长了几点才长出来一点，用90s150rpm的却怎么都长不出来。
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心晴
4楼2011-10-20 10:27:29
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